谷氨酰胺预处理对HK-2细胞缺氧 复氧损伤的保护作用.pdfVIP

实用药物与临床2013年第16卷第 11期 PracticalPharmacyAndClinicalRemedies，2013，Vo1．16．No．11 ·993 · · 论 著 · 谷氨酰胺预处理对 HK-2细胞缺氧 ／复氧损伤 的保护作用 冯娅妮 ，孙艳红 ，马 虹 [摘 要] 目的 探讨谷氨酰胺预处理对缺氧／复氧损伤后HK一2细胞凋亡的影响。方法 取离体培养的 HK一2细胞 ，随机分成 4组 ：对照组 (Con组)。CoC12组 ：加入 300ixM CoC12处理 4h，然后更换正常的培养基培 养 24h，之后更换无血清 的培养基培养 。谷氨 酰胺组 (GLN组 )：培养孔 中加入 10mmo1／L谷氨酰胺预 处理 24h 后 同CoC12组。ZnPP组 ：培养孔 中加入 3 M ZnPP(锌原 卟啉 ，HO一1抑制 剂 )和 10mmol／L谷氨 酰胺 处理 24h 后 同CoC12组。MTT 法测 定细胞 增 殖 ，流 式细 胞技 术测 定细 胞 的凋亡。RT—PCR技 术检 测 血 红素加 氧 酶一1 (Hemeoxygenase，HO一1)和凋亡相关基 因的表达情况。结果 10mmol／L谷氨酰胺预处理可 以明显增加 HK一2 细胞的增殖能力 ，减少凋亡 (P0．01)。预 处理上调 Ho一1的表达 ，同时上调 凋亡抑制基 因Bcl一2的表 达 ，下调促 凋亡基 因caspase一3和NF—KB的表达 。而这些调节作用可被 ZnPP抑制(P0．05或 P0．01)。结论 10mmol／ L谷 氨酰胺预处理对缺氧／复氧后 HK一2细胞有保护作 用，H0—1和 凋亡相 关基 因在预 处理 中起到重要 的作 用。 [关键词] 谷氨酰胺；Caspase一3；NF—KB；凋亡；HO一1 ProtectiveeffectofglutaminepretreatmentonHK．2cellsinjuryinducedbyanoxia- reOxygenanOn FENGYa_ni ，SUNYan—hong，MAHong(DepartmentofAnesthesiology，TheFirstAffiliated Hospital，ChinaMedicalUniversity，Shenyang110001，China) [Abstract] 0bjective Todeterminewhetherglutamine(GLN)pretreatmentmayprotecthumanproximalre— naltubularepithelial(HK_2)cellsagainstanoxia—reoxygenafioninjuryandtheroleofHemeoxygenasel (Ho一1)． Methods Cellswererandomlyassigned tofourgroups：controlgroup (Con)：inwhichcellswereuntreated；CoC12 group(CoC12)：inwhichcellswererteatedwith300I．LM CoC12(chemicalanoxiaanalogue)for1hour，culutredwith normal medium ofr24hours，na dhten stimulatedwiht noserum media；GLN group：in which cellswerepretreatedw iht 10mmol／LGLNofr24hours，htentreatedbythesamemehtodasgroupCoC12；ZnPPgroup (inhibitorofHo一1)：cells were rteated wiht 3 M ZnPP and 10 mmol／L GLN for24 hours，thentreatedby htesamemehtodasgroupCoC12．U— singM TT mehtodandflow cytometrytodetecttheproliferation and apoptosisofHK一2cells．