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假性血小板减少和原因研究 　　摘要：目的：探讨假性血小板减少的相关因素，为提高测定结果的准确度提供参考。方法：抽取同一患者当天静脉血，分别采用乙二胺四乙酸二钾（Ethylenediaminetetraacetic Acid-K2，EDTA-K2）抗凝，枸橼酸钠抗凝，EDTA-K2抗凝后转为枸橼酸钠抗凝处理的血液样本，三种方法处理后的血样均采用三分类和五分类法进行血小板测定，此外三种处理方法的血样均推血涂片，染色后置光学显微镜下观察血小板聚集情况。查阅相关文献结合此次实验结果分析引起测定结果差异的可能原因。结果：由于EDTA-K2导致血小板的聚集，使得依赖性假性血小板减少；经枸橼酸钠抗凝处理后，未见血小板聚集及假性血小板减少现象；自动化血细胞分析仪误将聚集的血小板判读为白细胞而使得白细胞假性增加。结论：EDTA-K2抗凝可能会引起血小板聚集与血小板假性减少，对于此类情况应采取手工计数和涂片复检法进行复测，以保证结果的准确性及避免误诊。 关键词：EDTA 枸橼酸钠抗凝 假性血小板减少 血小板聚集 Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.223 【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）07-0202-02 血小板在人体内具有维护血管内皮完整性和粘附、聚集、释放、促凝及血块收缩等重要功能，对血小板进行检测已成为入院后的常规检查项目，对于诊断多种疾病有重要作用。目前各大医院常用全自动血细胞分析仪对血小板进行测定，依据电阻抗或光散射原理推断血细胞的大小与数量，但有时血小板会以聚集状态存在，仪器误读为其它血细胞，最终出现血小板计数减少的假象，即假性血小板减少，故分析血小板假性减少的原因及应对策略就显得非常重要。本文就工作中出现的1例血小板假性减少现象进行报道并对相关的影响因素进行分析。 1 资料与方法 1.1 一般资料。2013年1月15日来我院内科就诊的73岁女性患者，在体检中心抽取该患者的静脉血，进行血细胞分析。 1.2 仪器与试剂。 三分类全自动血细胞分析仪Sysmex kx-21N 五分类全自动血细胞分析仪Sysmex XS-800i Sysmex配套试剂 质控品：Sysmex三分类质控批号有效期2013.4.20 Sysmex五分类质控批号 0490805 有效期2013.5.12 光学显微镜 OLYMPUS CX21 血细胞染液 瑞氏姬母萨然液 珠海贝索生物技术有限公司有效期 2014.8 EDTA-K2和枸椽酸钠抗凝试管 1.3 检验方法。静脉抽取2mL全血，以EDTA-K2抗凝，震荡混匀后置全自动血细胞分析仪（三分类）进行分析，全部操作严格按照规程要求。结果发现血小板明显低于参考区值，但该患者并无血小板减少的相关症状，因此我们对测定结果存有疑虑，于当天再次采集患者的静脉血进行测定。 抽取得到的静脉血平分为六份，共进行六次测定，分别如下： 一是EDTA-K2抗凝，采用全自动血细胞分析仪（三分类）进行分析（与首次测定方法相同）；二是EDTA-K2抗凝，采用全自动血细胞分析仪（五分类）测定；三是枸橼酸钠抗凝，采用全自动血细胞分析仪（三分类）测定；四是枸橼酸钠抗凝，采用全自动血细胞分析仪（五分类）测定；五是EDTA-K2抗凝后转后枸橼酸钠抗凝管中，采用全自动血细胞分析仪（三分类）测定；六是EDTA-K2抗凝后转后枸橼酸钠抗凝管中，采用全自动血细胞分析仪（五分类）测定。 以上全部操作均严格按照规程要求进行。行以上测定的目的在于比较实验操作、抗凝剂以及分析仪器对测定结果的影响。将第一、三和五次抗凝后的静脉血推血液涂片，用贝索瑞氏血细胞染色液染色，用光学显微镜在油镜下观察血涂片并照相，最后比较测定与观察结果并分析引起差异的原因。 2 结果 首次静脉血EDTA-K2抗凝测定结果为11×10-9/L，远低于参考值100-300×109/L，其余六次的测定结果见表1： 表1 不同的抗凝剂与测定仪器测定的血小板计数结果。 表中EDTA-K2+枸橼酸钠为EDTA-K2抗凝后再采用枸橼酸钠抗凝处理。由表可知，单纯使用EDTA-K2抗凝的血液样本无论是采用三分类还是五分类方法均出现了血小板的假性减少现象；而采用枸橼酸钠和EDTA-K2抗凝后再行枸缘酸钠抗凝的血样则测定结果正常。此外，五分类法测定的所有结果均小于三分类法，这可能是由于仪器的不同或测定误差所致，由于样本量较小，还不能得出确定的结论；EDTA-K2抗凝后转为枸橼酸钠抗凝较单用EDTA-K2抗凝的测定结果偏低，可能是由于枸橼酸钠未将所有由EDTA-K2导致的聚集血小