蛋白质化学终极版 (1).pptVIP

超滤透析 利用超滤膜在压力下使大分子滞留，而小分子及溶剂滤过的方法叫超滤透析。 超滤 透析疗法 透析疗法是利用半渗透膜来去除血液中的代谢废物和多余水分并维持酸碱平衡的一种治疗方法。 透析疗法 血液透析 腹膜透析 蛋白质分子聚集，从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀。 蛋白质沉淀 + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 溶液中蛋白质的沉淀 + + + + + + + - - - - - - - + - （沉淀） （疏水胶体） （疏水胶体） 蛋白质胶体颗粒的沉淀 盐析法 低温有机溶剂沉淀法 重金属盐沉淀法 生物碱试剂及某些酸类沉淀蛋白质 蛋白质沉淀方法 蛋白质变性、沉淀和凝固之间的关系 蛋白质变性导致构象破坏，活性丧失，但不一定沉淀； 蛋白质沉淀是胶体溶液稳定因素被破坏的结果，构象不一定改变，活性也不一定丧失，所以不一定变性； 蛋白质凝固是变性的特殊类型，是变性蛋白质进一步形成较坚固的凝块。 离心技术 离心技术是利用物体高速旋转时产生强大的离心力，使置于旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离之目的。 常用离心机类型 一般低速离心机的最高转速不超过6000rpm， 高速离心机在25000rpm以下， 超速离心机的最高速度达30000rpm以上。 常用离心方法 差速离心法 (differential velocity centrifugation) 速率区带离心法 (rate zonal centrifugation) 等密度离心法 (isopynic centrifugation) 差速离心法 差速离心法利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别，在同一离心条件下，沉降速度不同，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分步沉淀。操作过程中一般是在离心后倾倒的办法把上清液与沉淀分开，然后将上清液加高转速离心，分离出第二部分沉淀，如此往复加高转速，逐级分离出所需要的物质。　　差速离心的分辨率不高，沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于其他分离手段之前的粗制品提取。 速率区带离心法 速率区带离心法是离心前在离心管内先装入密度梯度介质(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等)，待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心。离心后在近旋转轴处的介质密度最小，离旋转轴最远处介质的密度最大，但最大介质密度必须小于样品中粒于的最小密度。这种方法是根据分离的粒子其在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带，达到彼此分离的目的。 离子键数量不多，但是最强的非共价键，主要存在于蛋白质分子结构的外部，少量存在于分子结构内部的离子键对蛋白质功能至关重要。 疏水键又称疏水性相互作用，是指疏水性分子或基团为减少与水的接触面积而彼此聚集的一种相对作用力。疏水键对稳定蛋白质构象非常重要，蛋白质内部主要聚集了疏水性氨基酸残基 。 共价键半径 范德华半径 范德华力是任何两个原子保持范德华半径距离时都存在的一种作用力 纤维状蛋白质和球状蛋白质 纤维状蛋白质是动物体的支架和外保护成分，其二级结构比较单一，如指甲和毛发的主要成分是?-角蛋白。 ?-角蛋白由大量二级结构为?螺旋的肽链经过多级缠绕形成，坚韧而富有弹性，这与其保护功能一致。 球状蛋白质主要是酶和调控蛋白，其构象中包含各种二级结构，由它们形成的结构域常常是酶的活性中心，或者是调控蛋白的蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA结合位点。 α-角蛋白（keratin） 纤维状蛋白质的构象 血红蛋白变构 松弛构象(relaxed) 紧张构象(tense) 血红蛋白的两种构象 血液中氧合血红蛋白的解离曲线 O2 H+或CO2 2，3-二磷酸甘油酸 (2，3-DPG） 血红蛋白的变构效应剂 血液H+浓度或PCO2增高时， Hb与O2的亲和力降低； 血液H+浓度或PCO2降低时，Hb与O2的亲和力增大， H+或PCO2对Hb与O2的亲和力的影响称为Bohr效应。 Bohr效应 许多蛋白质通过与其他分子可逆结合发挥作用，与之结合的分子叫配体。蛋白质与配体结合的部位叫结合位点。 配体的结合常导致蛋白质构象改变，称为蛋白质的变构效应。此类蛋白质称为变构蛋白，配体则称为调节剂、变构剂或效应剂。促进变构蛋白功能的调节剂是激活剂，抑制其功能的是抑