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黔岭淫羊藿总黄酮类成分对去势雌性大鼠骨质疏松症实验探究 　　[收稿日期] 2013-09-10 [基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项（2009ZX09103-426） [通信作者] *回连强，主管技师，Tel：（0102231，E-mail：huilq18@ [作者简介] 曹春雨，副研究员，Tel：（0102236，E-mail：chunyu.cao@ [摘要] 目的：观察黔岭淫羊藿总黄酮类成分（YYH-C）对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用。方法：将去卵巢大鼠随机分为模型组、YYH-C低、中、高剂量组（生药0.7，1.4，2.8 gkg-1）和阳性药补佳乐组（0.15 mgkg-1），另设假手术组。连续灌胃给药3个月，测定血清中甲状旁腺激素（PTH）、I型前胶原N末端前肽（PINP）、碱性磷酸酶（ALP）、钙（Ca）和磷（P）含量；取左侧股骨和腰椎，进行骨计量学指标测定，包括骨密度、骨钙磷含量和骨灰重/干重百分比；取右侧股骨进行骨组织形态学观察。结果：和假手术组比较，模型组大鼠PTH，ALP明显升高，PINP，血钙水平明显降低。YYH-C 3个剂量组均能明显对抗PINP的降低，低、中剂量组尚能明显抑制PTH的升高，高剂量组能明显增加血钙含量，但对ALP的增高无明显抑制作用，各组之间血磷含量无明显差异；模型组动物股骨、椎骨骨密度、灰重/干重比值和Ca，P含量与假手术组比较均明显降低；YYH-C高剂量组能明显提高骨密度，3个剂量组均能明显增加灰重/干重比值和股骨、椎骨Ca，P含量；YYH-C能显著升高股骨近端的骨小梁平均厚度、骨小梁面积、骨小梁面积百分比以及骨干的皮质骨面积百分比等，增加骨小梁表面成骨细胞数，减少破骨细胞数。结论：YYH-C能有效控制去卵巢所致骨质疏松模型大鼠的骨量丢失，防止骨显微结构的改变，抑制骨吸收亢进，进而对抗去卵巢后的高转换型骨质疏松症。 [关键词] 黔岭淫羊藿总黄酮类成分； 去卵巢大鼠； 骨质疏松症 随着人口老龄化，骨质疏松已成常见病、多发病，尤其是绝经后骨质疏松症的患病率逐年上升，其与卵巢功能减退、雌激素水平降低密切相关，最终导致骨形成与骨吸收偶联失衡，出现骨转换加速、骨密度降低、成骨细胞减少、破骨细胞增多、骨组织微细结构被破坏[1]。中医学理论认为“肾为先天之本，主骨生髓”，骨的生长、发育与肾密切相关。淫羊藿作为一种传统中药，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功效[2-3]。目前的研究表明淫羊藿中以淫羊藿苷的药理作用最为明确[4]，药典中亦以此作为淫羊藿药材的质量控制标准。黔岭淫羊藿是贵州比较多的淫羊藿品种，其黄酮类成分的组成特点是淫羊藿苷的含量不是很丰富，但朝藿定C含量相对较多，按照以往的标准，入药较少。邓炜等[5]报道，黔岭淫羊藿对地塞米松所致的骨质疏松模型小鼠具有明显的改善作用。作者前期研究结果显示，黔岭淫羊藿总黄酮能明显促进hFOB1.19人SV40转染成骨细胞的增殖，同时能显著促进细胞分泌ALP，提示黔岭淫羊藿总黄酮成分具有促进成骨细胞生长、分化的作用[6]。本实验进一步观察了黔岭淫羊藿总黄酮提取成分对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。 1 材料 1.1 试剂 PTH试剂盒（批、PINP试剂盒（批均为北京华英生物技术研究所产品。ALP试剂盒（批号GG1102AD03）、血钙测定试剂盒（批号LL1104AD08）、血磷测定试剂盒（批号LL2102AD02T）均为北京万泰德瑞诊断技术有限公司产品。 1.2 药物 取黔岭淫羊藿药材，加20倍量70%乙醇回流3次，每次1 h，合并3次提取液，回收，得浓缩液。浓缩液加蒸馏水（1∶1）放置，弃沉淀，取上清液，再浓缩得浸膏。80 ℃减压干燥，粉碎，即得黔岭淫羊藿总黄酮类部分（YYH-C），其提取率为4.96 mgg-1（生药），其中淫羊藿苷1.17%，朝藿定C8.87%。 1.3 动物 SD大鼠，SPF级，雌性，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号SCXK（京）2006-0009。 1.4 仪器 LEXXOS双能X线骨密度测定仪（DMS公司，法国）；r-911全自动放免计数仪（中国科技大学实业总公司）；日立7160全自动生化仪（日本）；Agilent 7500ce 电感耦合等离子体质谱仪（美国）；Shandon Excelsior ES全自动脱水机（英国）；Shandon Histocentre 3石蜡包埋机（英国）；Shandon Finesse 325切片机（英国）；Shandon Varistain Gemini全自动染色机（英国）；Olympus CX41-DP25显微镜及图像分析系统（日本）。