细胞分子生物学（扬州大学）第十四章 真核基因转录的调节.pptVIP

真核基因表达调控的最显著特征是能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从而实现“预定”的、有序的、不可逆转的分化、发育过程，并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常功能。 在众多的调控环节中，以转录水平的调控最重要 二、真核基因表达调控的分类 瞬时调控：或称可逆性调控，相当于原核细胞对环境条件变化所做出的反应，包括某种底物或激素水平的上升或降低以及细胞周期不同阶段中酶活性和浓度的调节 发育调控：或称不可逆调控，是真核基因调控的精髓部分，决定着真核细胞生长、分化、发育的全部进程 五、反式作用因子的分类 根据功能可将其结构分为不同的结构区域： DNA结合结构域（DNA binding domain）：多由60-100个氨基酸残基组成的几个亚区构成 转录激活结构域（activating domain）：常由30-100氨基酸残基组成，有富含酸性氨基酸、富含谷氨酰胺、富含脯氨酸等不同种类 连接结构域：即将两个结构域相连接，不与DNA直接结合，但能通过转录激活结构域直接或间接作用于转录复合体而影响转录效率 螺旋-转角-螺旋结构域 （helix-turn-helix motif） 2.同源异型结构域 4.螺旋-环-螺旋 (helix-loop-helix，HLH) 六、真核基因转录调控举例 1. 组成型转录因子：SP1 SP1是启动子GC盒（GGGCGG）的结合蛋白，是一种组成型转录因子。 SP1包括3个锌指结构DNA结合结构域以及2个富含谷氨酰胺转录激活结构域。 与TAFII中的一个因子发生特异作用，以此来调控起始转录复合体。 2. 激素调控：类固醇激素受体 脂溶性类固醇激素可穿过细胞膜与类固醇激素受体相互作用 当无类固醇激素存在时，其受体与抑制蛋白结合游离于细胞质 当存在类固醇激素时，类固醇激素与受体结合，形成的受体二聚体转移到细胞核中，其DNA结合结构域与特定的DNA序列（反应元件）作用，从而激活目标基因转录 3. 磷酸化调控：STAT蛋白（signal transducers and activators of transcription) 许多激素并不穿过细胞，它们与细胞表面的受体结合，通过称为信号传导的过程将信号传递给细胞内的蛋白，该过程通常涉及到蛋白磷酸化。 * 第十四章 真核基因转录的调节 一、真核基因表达调控的特点 三、顺式作用元件 存在于DNA上影响基因转录效率的序列称为顺式作用元件，能与特异的转录因子结合而影响转录 顺式作用元件在序列上通常是保守的 其中起正调控作用的顺式作用元件包括启动子(promoter)、增强子(enhancer)等；起负调控作用的元件有沉寂子(silencer)等 四、反式作用因子 与DNA元件相互作用的蛋白质因子称为反式作用因子（trans-acting factors） 不同基因有不同的上游启动子元件组成，能与不同的转录因子结合，这些转录因子通过与基础的转录复合体影响转录的效率 不同的蛋白因子间可以相互作用，多数通过蛋白质-蛋白质间作用，再与DNA序列联系并影响转录效率 转录因子之间或转录因子与DNA的结合可引起构象的变化，从而影响转录的效率 结构域长约20个氨基酸，包括两个α-螺旋区和将其隔开的β转角 C端螺旋称为识别螺旋，螺旋上的氨基酸侧链可帮助其专一性识别DNA，主要是填入DNA的大沟中 另一螺旋无特异性，与DNA骨架相接触 由同源异型基因编码的蛋白，C端形成3个螺旋，螺旋3（识别螺旋）结合于DNA大沟处，与磷酸骨架及特异性碱基接触； 螺旋1和螺旋2则横卧于DNA双螺旋的外部。N端区域探入小沟，提供辅助的亲和力 3. 锌指结构域（zinc finger domain） DNA结合蛋白中常见的结构基序，长约30个氨基酸，每个重复的指状结构约含23个氨基酸 锌以4个配价键与4个Cys（Cys2/ Cys2 锌指）或2个Cys和2个His相结合（Cys2/His2锌指），与Zinc结合后锌指结构较稳定 每一个单位可以其α螺旋部分伸入DNA双螺旋的大沟，接触5个核苷酸 长约50个氨基酸残基，同时具有DNA结合和形成蛋白质二聚体的功能，其主要特点是可形成一长一短两个亲脂性α-螺旋，螺旋之间由环状结构相连，其DNA结合功能由一个较短的富碱性氨基酸区所决定 5. 碱性-亮氨酸拉链（basic leucine zipper，bZIP） 亲脂性的α螺旋每隔6个残基出现一个亮氨酸，导致这些亮氨酸残基都在α螺旋的同一方向出现 由赖氨酸和精氨酸组成DNA结合区 两个相同结构的两排亮氨酸残基能以疏水键结合成二聚体，二聚体的另一端肽段富含碱性氨基酸残基，借其正电荷与DNA双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合 若不形成二聚体则对DNA的亲和结合力明显降低 二聚体形成 核内转移