昆明小鼠听皮层声反应特征的区域分布.docVIP

昆明小鼠听皮层声反应特征的区域分布 沈钧贤 徐智敏 姚煜东 ( 中国科学院生物物理研究所 , 北京 100101) 摘要 用微电极技术研究了昆明小鼠听皮层声反应特征的区域分布. 首次揭示初级听区 (A Ⅰ) 和前听区 (AAF) 最佳反应频率 (BF) 分布具音调拓扑组构 ,但频率梯度方向相反. 在同一 等频带内 ,近腹侧的听神经元的频率阈值曲线较宽 ,最低阈值较小. A Ⅰ与 AAF 的 BF 在 4 与 38 kHz 之间. 40 kHz 以上的神经元分布在 AC 背吻侧. 结果表明 : 昆明小鼠是一种好的听实 验模型. 关键词 小鼠 听皮层 声反应特征的区域分布 频率阈值曲线 频谱是动物感知声信号的基本特征. 探索听皮层 ( auditory cortex , AC) 神经元的最佳反应 频率 ( best frequency , BF) 及其他特征的区域分布 ,对于了解听觉感知机理尤为重要. 关于 AC 频率表达的研究表明 ,听觉频率范围存在着种属差异. 例如 ,沙鼠1 、狨2 、回声定位蝙蝠3 ～7 分别对低频 、中频 、高频有很强的表达 ,但 BF 分布明显不同. 我们对昆明小鼠的行为实验表 明 ,它们能发声 ,有良好的听力. 叫声的主频介于 10 与 20 kHz 之间 ,声行为反应的最低阈值 约 5 dB ( SPL) ,有反应的频率范围为 1～ 65 kHz. 昆明小鼠的皮层较平滑 ,易于探测与分析声 参数的表达. Stiebler 等人8 用多单位电生理记录法研究了麻醉后家鼠 ( Mus musculus ) 左 、右 AC 频率表达与音调拓扑组构的差别. 但正常小鼠 AC 的声反应特征的区域分布还知之甚少. 本文用微电极电生理记录方法 ,研究了昆明小鼠 AC 神经元声反应特征的区域分布 ,为揭 示皮层听信息加工机理提供依据. 1 材料与方法 ( ⅰ) 材料. 6 只听力正常的雌或雄性昆明小鼠 ,生后 4～5 周 ,体重约 20 g ,由中国科学院 遗传研究所提供. 戊巴比妥钠 (Nembutal , 40 mg/ kg 体重) 麻醉动物 ,手术细节参照文献 7 . 用强力胶将平头钉粘在颅骨上 ,经螺钉固定在金属棒上以稳定头部. 实验记录期间 ,用 Nem2 butal (8 mg/ kg 体重) 和安定止痛剂 (fentanyl 0 . 08 mg/ kg 体重 , droperidol 4 mg/ kg 体重) 使动物 维持清醒状态. 用 3 mol·L - 1 KCl 灌注玻璃微电极 (阻抗约 15 MΩ) ,记录 AC 听觉神经元的动 ( ⅱ) 记录. 作电位. 无关电极放在附近颞肌. 电极由遥控显微驱动器 ( SM- 21 , Narishige , 日本) 推进 ,精 度 1μm. 在 AC 表面以约 250μm 间隔插入电极 ,以人字缝为原点测出电极位置. 神经活动经 放大 (List- electronic L/ M- 1 , 德国) , 输到双线记忆示波器 (VC- 10 , Nihon Konden , 日本) ,直方图 仪 (DAB- 1100 , Nihon Konden , 日本) 和专用计算机 (DATA 6000 Universal Waveform Analyzer ,美 国) 以获得直方图 (post- stimulus- time histograms , PSTH) 及其他有关数据. 实验在电磁屏蔽 、隔 声消音室内进行 ,温度 24～26 ℃. ( ⅲ) 声刺激. 由刺激器 ( HI-MED 100 Series ,英国) 产生电信号 (时程 60 ms ,上升 、下降各  5 ms) ,经功率放大输入到宽带喇叭 ( EAS- 10TH800B , Matsushita Technic , 日本 ,频响范围 3～100 kHz) 产生短纯音 ,速率 1/ s. 喇叭与对侧耳相距 50 cm. 将 Brüel Kjaer 4135 传声器 ( 丹麦) 放 在耳廓位置 ,经 B K 2610 型放大器测出声刺激强度 ,以声压级 ( sound pressure level , SPL) 表示 , 0 dB ( SPL) 相当于 20μPa . ( ⅳ) 数据分析. 系统地改变刺激频率与强度 , 测出听神经元声反应的 BF , 最小阈值 (minimum threshold , MT) ,频率调谐曲线 ,和强度为阈上 20 dB 的反应潜伏期. PSTH 图示每个 神经元的放电模式和总脉冲数. 选择同一动物不同位置的听神经元进行反应特征区域分布的 研究