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试验碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定-厦门大学生命科学学院
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碱性磷酸酶的分离提取
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大 王勤
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实验目的
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1.学习蛋白质分离纯化的一般原理和步骤
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2.掌握牡蛎碱性磷酸酶制备的操作技术
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3.对硝基苯酚标准曲线的制作
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实验原理
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蛋白质的分离纯化
separation and purification
材料 鲜度、含量、保存方法
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组织捣碎法、研磨法、匀浆法、超声破碎法、
破碎 学
冻融法等 学
科
抽提 提取缓冲液（pH、温度等）、搅拌、增溶剂、抽提
命
液与抽提物的比例等
生
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分离 盐析、有机溶剂（乙醇、丙酮等）、等电点沉淀等
大
门
厦
纯化 离子交换柱层析、凝胶过滤柱层析、亲和层析等
分析及鉴定 酶活力、纯度、分子量
盐析Salting-out
高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，
从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其
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