白木香茎、叶蛋白质组研究初探.pdfVIP

StraitPharmaceuticalJournalVol26No．122014 白木香茎、叶蛋 白质组研究初探 黄珊珊 (广东省中药研究所 广州 510520) 摘要 ：采用三氯乙西吏／丙酮沉淀法分别对白木香茎和叶进行蛋白质提取，利用一、两次水化法分别对所获蛋 白进行溶解，并通过研究蛋白得率、 比较蛋白浓度及经SDS单向电泳所获条带的清晰度，分析 白木香茎、叶蛋白制备与SDS单向电泳条件的优劣。结果表明：白木香 茎、叶蛋白得率分别是 73mg·gI1与52mg·g～；一次水化法得到的茎、叶样品蛋白终浓度分别为3．621a,g·L～，4．17p．g·L～，两次水化法所 获得茎、叶蛋白终浓度为1．53 ·L～，2．121J,g·L～。两种方法所获蛋白样品的SDS．PAGE条带均较模糊，但后者的单向电泳条带杂质较 少，究其原因可能是蛋白制备、电泳条件的某些方面仍需改进。该研究为进一步从分子生物学的角度研究白木香结香机制提供了技术的基础。 关键词 ：白木香；蛋白质；十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 中图分类号：Q503；R282．71 文献标识码：A 文章编号 ：1006-3765(2014)一l2 941-0037-03 ThePrima StudiesontheProteomicsofStem andLeavesinAquilaria Sinensis(Lour)Gilg HUANGShan-shan(GuangdongResearchInstituteofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou510520， China) ABSTRACT：TCA／acetoneprecipitationmethodwasemployedtoextracttheproteinsofstemandleavesinAquilaria sinensis(Lour)Gilgseparately，andone—lysisandtwi—lysiswereusedtodissolvetheproteinsamples．Throughstud— yingtheharvestrateofproteinsextractionandcomparingtheproteinconcentrationandtheclarityofproteinbandings from SDS—PAGE singledimensionaleleetrophoresis，htequalitiesoftheproteinpreparationandtheSDS—PAGEcondi— tionswereanalyzed．Theresultindicatedhtat，theyieldofproteinsextractionrfom stem andleaveswere73mg ·g一 and52mg ·g～ respectively，theproteinconcentrationofstem andleaveswhichweredissolvedbyone—lysisrespec— tivelywere3．621xg · L～ ，4．171~g · L～ ，andwhichweredissolvedbytwi—lysisrespectivelywere1．53txg · L～ ，2．121xg · L～．However，theproteinbandingsrfom SDS—PAGEwereallfuzzy，whiletheimpuritiesofthepro— teinsamplesfrom twi—lysiswerefewerhtanhtatfrom one—lysis．Thereasonpossiblywashteproteinpreparationand theelectrophoresisconditionstillmustbeimproved．Theresearchwouldprovidethetechnicalfoundationforfurther- molecularbiologystudiesofagarwood—inductionmechnaism inAquilariasinensis(Lour)Gilg． KEYWORDS：Aquilariasinensis(Lour)Gilg；Protein；SDS—PAGE 白木香[Aquilariasinensis(Lour)Gilg]又称土沉香，属瑞 用蛋白质提取的常用方法一三氯乙酸(TCA)／丙酮沉淀法，分 香科沉香属植物，为我国特有的热带及亚热带常绿乔木，现已 别对白木香茎和叶进行蛋白质提取，并利用一次和两次水