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鱼呼肠孤病毒诱导草鱼肾细胞凋亡屈三甫1张小榕水生生物学报
24 6 Vol. 24, No.6
2 00 011 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA Nov . , 2000
1 1 1 1
屈三甫 张小榕 郑从义 胡国斌
2 2 2 2
艾桃山 丁桂珍 喻运珍 刘 颖
( 1 , 430072; 2 , 430065)
:
(CIK) , CIK ,
;; , ,
; 180 200bp DNA ;
,48h, 15%
,CIK
: ; ;
+
: S941. 41 2 : A : 1000- 3207(2000) 06- 0616- 06
(He orrhage Disease of Grass carp) ,
, , ( Fish Reovirus,
FRV),
[1 3]
(Apoptosis),
1
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(CIK) , DMEM/F12
Sig a, ( FCS)
1.2 CIK DMEM/F12+ 10%FCS
5
310 T - 25 6c ,28, 5%CO
2
24h
5
1.3 , 10 TCID 1 L
50
: 1999- 04- 19; : 1999- 09- 15
: (94- 170)
: ( 1966 ) , , , ,
:
6 :
617
CIK ,28 1h, , 5%FCS 5 L, ,
28, 5%CO ,6h, 12h, 24h,48h
2
[ 4]
1. 4 Hoechst 33258 CIK ,,
,Oly pus
[5]
1.5 ,H- 300
1. 6 DNA [6] CIK DNA,2%,
UV SX- 300 DNA
1. 7 (FCM) [7] , :
,PBS 2 ,75%2 L ,- 20 12h , ,
RNase200L( 1 g/ L)30 in ,800L PI ( 100g/ L PI, Sig
a; 1.0% Triton- X100, Servea; 0. 9% NaCl) 4 30 in, FCM ( FACS,
B. D. )
2
2. 1 CIK
, CIK 12h, ,
;24h , ,,; 48h ,
, ,,
(: 1,2)
, CIK 12h,
;24h ,;48h ,
; (1)
1 CIK
Fig. 1 Hoechst 33258 staining of CIK cells.
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