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．病毒学．
人类乙肝病毒体外感染树胸
肝原代细胞的研究
张晶晶 杨光 杨春 蒿艳蓉 曹骥 欧超 李瑗 班克臣
Hubert
E．Blum苏建家
【摘要】 目的为进一步研究人类乙肝病毒(HBV)提供接近自然感染状态的理想细胞模型。
blot
方法体外二步灌流法分离树嗣原代肝细胞，纯化后的乙肝患者血清感染上述肝细胞，Southern
和Northern
blot检测感染后细胞内的DNA和RNA，ELISA方法检测细胞上清的HBsAg，免疫组化检测
细胞内HBsAg的表达。结果可检测出肝细胞内cecDNA(共价闭合环状DNA)、pgRNA(前基因组
RNA)和sgRNA(亚基因组mRNA)，感染后第7天，信号开始增强，持续到实验结束的第14天。细胞
上清中HBsAg自第1天到第5天S／CO值逐渐下降，随后S／CO值逐渐升高。结论HBV可在原代
树砌肝细胞中复制和表达。
【关键词】 乙肝病毒；感染；树嗣；原代肝细胞
ontheinfectionof Bvirusinvitro
hepatitis zHANG小肌g-
Study primarytupaiahepatocytes’d帕A
E．
Chun。HAo Chao，LIYuan，BANKe—chen，Hubert
社ng’．YANGGuang，YANG Yan—rong，CAO嚣。oU
Tumor Medical
Blum，Su^an-jia．’锄铋妣dHospitalofGuangxi Univers砂，Nanning卯002』，China
author：SU胁n衲，Email：jianjiasu2002@yahoo．COIn
Corresponding
for
To abettercellmodelof natureinfeetiousstatefurther
【Abstraet】objective closely
provide
of B wereisolatedthe
research virus(HBV)．MethodsPrimary by
hepatitis tupaiahepatoeytes two—step
infeetedwith serumfrom with B．
method．The werethen
perfusion hepatocytes purified patientshepatitis
with blot in
DNAandRNAisolatedfromthe weredetectedSouthernandNorthern
hepatocytes blot．HBsAg
WaStestedimmunohistochemicalmethod．Results and couldbe
supematant by eceD
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