实验室血小板检测假性减少的原因探讨.docVIP

精品论文 参考文献 实验室血小板检测假性减少的原因探讨 资阳市第一人民医院 641399 摘要：目的：探讨假性血小板减少的影响因素及解决办法。方法：重新抽静脉血分别用EDTAK2和EDTAK2middot;NaF抗凝，1 h后用Sysmex 800i血液分析仪检测，2次仪器检测值与人工显微镜计数值进行比较。结论：抽血不当和EDTA依赖性凝集是造成假性血小板减少的主要因素，EDTA依赖性凝集患者需用EDTAK2middot;NaF抗凝血检测；有大血小板和小血小板干扰检测时，须手工显微镜计数，应加强血片的复检。 关键词：血小板；血小板计数；血细胞分析仪；假性血小板减少；原因分析 目前，由于全自动血细胞分析仪的广泛使用，使血小板的检测常规化，具有快速、简便、重复性好的优点，但经常出现假性血小板减少的检测结果，造成错误的临床诊断，这是检验工作者一直关注的问题。为了探讨假性血小板减少的形成原因，我们进行了系列的实验研究，现报告如下。 1 资料与方法 1.1 器材 800i血液分析仪；EDTAK2抗凝管；CH2双目显微镜. 1.2 试剂 800i血液分析仪配套试剂；草酸铵稀释液及瑞氏染液；氟化钠（NaF），分析纯AR，CHECK质控血。 1.3 EDTAK2middot;NaF抗凝管制备 氟化钠6 g加100 ml蒸馏水，取100 mu;l置于EDTAK2抗凝管中，56 ℃烤干备用［1］。 1.4 试验标本的选择 2014年5月至2015年5月住院患者的血常规样本中（EDTAK2抗凝），将PLTlt;100times;109/L的标本选出，涂血片复检，去除相符合的标本（血片中无聚集血小板、散在分布；与人工显微镜计数值相符，在plusmn;3 SD内），即为假性血小板减少，作为实验标本，共计306例，其中骨科24例，呼吸科36例，心血管44例，产科20例，肿瘤科32例，血液科26例，新生儿60例，老年科64例；其男性162例，女性144例；年龄范围3 h～86岁，平均年龄48.3岁。其测定值作为第一次测定值列入结果统计。分析前，仪器常规保养，本底计数正常，中、低2个批号的质控血检测均在控，严格按标准操作程序上机检测。 1.5 方法步骤 由2位经验丰富的检验师对这306例患者重新抽血2 ml，分别加入1 ml于EDTAK2抗凝管（A管）和EDTAK2middot;NaF抗凝管（B管）中，充分混匀，室温放置1 h，同时取未抗凝血20 mu;l加入含0.38 ml草酸铵稀释液的试管中，进行血小板人工显微镜计数，每个标本由2个人分别计数2次取平均值作为参考值；1 h后分别将A管和B管抗凝血涂血片经瑞氏染色显微镜下观察，根据A、B两血片中有无聚集的血小板、大小血小板的分布以及血标本有无黄疸脂血等，将306例假性血小板减少标本分为5组即EDTA依赖性凝集（PTCP）：A血片中有大量血小板聚集，一般为10个～20个血小板聚集成堆，更大的聚集可有50个以上，而与之相对应的B管血涂片则无聚集血小板，血小板呈散在分布。大血小板组（LP）：A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、以大血小板为主。小血小板（SP）：A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、以小血小板为主。抽血不当因素（IVBC）：A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、大小较为均一，标本无黄疸脂血等异常，而重抽血前的第一次抗凝血涂片中有大量聚集的血小板。其他因素：A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、大小较为均一，标本有黄疸、脂血等异常变化。把EDTA依赖性凝集组，用B管血，其余组用A管血上机检测，这次检测值作为第二次测定值进行统计。选公务员招收体检血50例作EDTA依赖性凝集因素正常对照，男32例，女18例，年龄23岁～29岁。抽血2 ml，分别加入1 ml于EDTAK2middot;NaF抗凝管（C）管和EDTAK2middot;NaF抗凝管（D管）中，充分混匀，室温放置1 h后，分别上机检测。 1.6 数据处理 应用SPSS 11.5软件进行数据分析，数据以plusmn;s表示，采用t检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。 2 结果 用SPSS 11.5软件进行数据分析，EDTA依赖性凝集与抽血因素两个组的第一次测定值与人工计数值、第一次测定值与第二次测定值差异均有显著性Plt;0.01，第二次测定值与人工计数值差异无显著性Pgt;0.05；而大血小板因素、小血小板因素与其他因素三个组第一次测定值和第二次测定值与人