实验性胃癌前病变与胃粘膜上皮 紧密连接的关系.docVIP

精品论文 参考文献 实验性胃癌前病变与胃粘膜上皮 紧密连接的关系 陆昌荣#61472;，颜少芳，黄灿东 (横县人民医院，广西 南宁，530300) 摘要：目的 探讨实验性胃癌前病变与胃粘膜上皮紧密连接的关系。方法 利用化学致癌剂MNNG诱变形成实验性胃癌前病变的动物模型，用HE 染色光镜下 观察与比较胃癌前病变动物模型胃粘膜病理形态，透视电镜观察胃癌前病变动物模型胃粘膜上皮紧密连接处的间隙变化。结果 胃癌前病变的不同时程、不同病理 阶段胃粘膜异型增生的病理形态学各异，且动物模型上皮细胞间隙比较具有统计学差异(P lt; 0.05)。结论 胃粘膜上皮损伤是胃癌前病变的重要病理学特征，缩小上 皮细胞间隙对于逆转胃癌前病变具有重要意义。 关键词：胃癌前病变；胃粘膜上皮；肠化生；异型增生；紧密连接 胃癌前期变化可以分为癌前状态和癌前病变两个方面，前者为 临床概念，指胃癌前期疾病(如胃溃疡、胃息肉、肠胃炎、慢性萎缩 性胃炎、肥厚性胃炎等)，后者为病理概念[1]。胃癌前病变中的异型 增生可以分为轻度、中度、重度三种类型。本研究利用化学致癌剂 N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导建立实验性胃癌前病变动 物模型，通过观察胃癌前病变动物模型的病理形态学观察，来探讨 胃癌前病变与胃粘膜上皮紧密连接的关系。 1 方法 1.1 实验性胃癌前病变动物模型的建立及病理形态学观察 本实验采用化学致癌剂MNNG作为工具药诱导建立实验性动物 胃癌前病变模型，主要模拟人不当摄入硝酸盐在胃内转化为亚硝酸 铵等致癌物质而产生细胞癌变的病理过程。将45 只大鼠随机分为A、 B、空白三组，每组15 只，A、B两组动物模型分别采用30mu;g/ml、 80 mu;g/ml 的MNNG 溶液作为大鼠饮用水供大鼠自由饮用，空白组 直接饮用正常的饮用水。各组大鼠均常规喂饲标准饲料[2]。三组动 物模型在第10 周处死6 只，第20 周处死9 只。断头处死小鼠，将 胃部组织剖开，生理盐水漂洗后置于甲醛中固定，胃组织切片作HE 染色。按照动物模型中胃粘膜的损伤深度和程度分级，具体观察指 标包括胃粘膜糜烂、肠上皮化生、胃粘膜萎缩、异型增生等。 1.2 观察动物模型胃粘膜上皮紧密连接的变化 胃粘膜的第一道屏障是由胃粘膜上皮细胞构成。胃粘膜细胞壁 相邻细胞紧密连接，胃粘膜上皮细胞内的黏原颗粒分泌黏液，这些 黏液进一步形成凝胶状之后覆盖于胃粘膜的表面，来对抗外界刺激 对胃粘膜的损害。切取胃癌前病变动物模型的前胃组织，使用磷酸 缓冲液进行冲洗，再进行酒精的梯度脱水操作，超薄切片以及染色 操作，而后使用透视电镜观察胃癌前病变动物模型胃粘膜上皮紧密 连接处的变化。随机拍摄胃粘膜上皮连接复合体，每个样本拍摄3 张照片，扫描之后借助图像分析仪来测量胃粘膜上皮细胞间的最大 间隙，取三组数据的平均值作为样本胃粘膜上皮最大间隙的统计结 果。 1.3 统计学分析 相关数据应用统计软件SPSS(version 13.0)进行处理，组间比较 采用t检验，以Plt;0.05为差异具有统计学意义的标准。 2 结果 2.1 不同程度胃癌前病变的病理形态学观察 轻度的胃粘膜异型增生胃粘膜表面充血水肿，胃镜下可见腺管 结构、形态呈现轻度不规则，上皮细胞核为长杆状多位于细胞基底 部，轻度病变位于粘膜浅层或局限于粘膜深层。中度异型增生粘膜 病变达到粘膜中层及中层以下，粘膜粗糙为主，镜下腺管结构和形 态不规则，腺管分枝状或灶状排列，有些病患的粘膜深层也可见囊 状扩张的腺管。重度异型增生粘膜病变几乎达到粘膜全层，腺体结 构及形态不规则，黏膜腺体常见“背靠背”及偶见“共壁”现象(见 图1)。 2.2 不同浓度MNNG 在不同时限对大鼠胃黏膜的影响 从第九周开始大鼠的胃粘膜出现不同程度的损伤，但A、B 两组 动物模型的损伤程度并无明显差异。随造模时间及浓度的增加，胃 黏膜损伤程度明显加重，第20 周时A、B 两组动物模型的胃粘膜深 度损伤指数分别为1.67、2.03 分。 2.3 胃粘膜上皮紧密连接与胃癌前病变的相关性分析 将进行病理学观察的胃癌前病变动物模型按照全国胃癌协作组 三级诊断标准划分为轻度组、中度组、重度组，从三组动物模型中 分别选取8 只动物模型制作其病理学切片，对其进行进一步的电镜 观察。表1 中列举了胃癌前病变动物模型上皮细胞间隙的平均值。 三组间的胃粘膜上皮紧密连接比较具有统计学差异(Plt;0.