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2017-12-28 发布于北京
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pDsRed1-C3LOC51255真核表达质粒的构建及在HePG2细胞的表达定位.pdf

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pDsRed1-C3LOC51255真核表达质粒的构建及在HePG2细胞的表达定位.pdf

402 ·论著· 黄湘1，谭家余1，邱玉林1，梁文军1，周铭1，李明24 (1嘉应学院医学院基础部病原教研窜，广东梅州51403l；2南方医科大学牛物技术学院，广东广州510515) Ih啮：truc廿on [摘要] of职cIm_lb佃【舳t吼止铷呵础c 并检测其在人肝癌细胞株HePG：中的表达和亚细胞定位。懿p托ssi蚰Veat叫邮Redl-C3／LoC51255 and驯ltⅪ山lll盯l伙m切ation0fLoC512弱 LOC51255 cDNA全长序列，并将该片段亚克隆到真核表达载 in proteiIlI吣c枷№ 达质粒经双酶切和测序鉴定后，采用脂质体法将该重组质粒转染人肝癌细胞株HePG：，再用荧光显微镜直接观察肌刎vG‰n91，7从r．，施．弘1，讲U玩一‰1，皿州G ‰伽1，Z肋U施昭1，Ⅱ施n924 Loc51255在其中的表达及定位情况。结果：经双酶切及 1 of of Dep舡协1entEtiology，MedjcalCoUegeJia妒ngUnive倡it)r， 0fsoutllemMedjcal Meizh叫51403l；2TheBiotechnolog)，College 5105 15，Chi咂 UIlive瑁ity，GuangzIIou con科ⅢcIthere∞mbinant [Abstran]AIM：To eukary． otic veclor l255andinvest_． exp怕豁ion pDsRedl-C3／LOc5 细胞的胞质，为进一步研究人类Loc51255基因的功能奠定 ofLOC51255 in aatethesub∞¨uIar10calizatiOn prmein 了基础。 cDNA0fLOC51255w鸽 HePG，∞¨Iine．M哐THODS：The fromthe怕∞mbinant amp晰ied pIasmidpEr28b／LOC51255 亚细胞定位 PCR．TheaIm LOC51255from by genefragment pMDl8-T／ [中图分类号】R392．12[文献标识码】A LOC51255wassubcIOnedintO vector eukanfoticexpression recOmbjnant pDsRedl-C3．ThepJasmjdpDs只ed】·C3／ LOC51255wasidentmcatedBamHI／肋DI doubIe by diges- tiOnand andthentransfededintO 碱基，编码产物为含153个氨基酸、全长拥有一个 sequenceanaIysis， 2000．The of HePG，ce¨|．nebylipofedamineexp怕ssion砌NG指功能域的小分子蛋白质，属于C3HC4型锌 LOC51255DrOteinanditssubce¨uIarlocaIizatiOnweredetec-指蛋白。氨基酸序列分析显示该蛋白在进化中比较 t