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多聚磷酸盐激酶(PPK)基因植物表达载体的构建.pdf
ofAnhui 责任编辑朱琼琼责任校对卢瑶
安徽农业科学,Joumal ASh.Sci.2012,40(31):15139—15141
多聚磷酸盐激酶(PPK)基因植物表达载体的构建
曹访,杨志红4,韩志萍,杨倩,费佳玲 (湖州师范学院,浙江湖州313000)
HD Kit将
基因序列(193719)设计引物,以E.coliD1450t基因组DNA为模板,通过PCR扩增得PPK基因,然后用In—Fusion”1Cloning
P尸!K基因克隆到pCAMBIAl302载体的Nco l【b的PPK基因片
I酶切位点。[结果]序列测定结果显示,pCAMBIAl302一PPK含有约2.O
合表达载体pCAⅣIBIAl302一PPK。
关键词大肠杆茵;多聚磷酸盐激酶基因;植物表达栽体;构建
中图分类号$603.6文献标识码A 文章编号0517—6611(2012)31—15139—03
of
ConstructionofPlant,-based Vector KinaseGene
Expression Polyphosphate
CA0 etal Teachers
(H[uzhou 3130()o)
Fang Collage,Huzbou,Zhejiang
of fluorescent
Abstract aimwastoconstructthefuIsion vector
【Objective】The expression polyphtosphatekinase(PPK)andgreen protein
basedonPPK
(GFP)genes,.[Method]Inthisstudy,theprimersweredesigned gene
D1q ofPPK
nom]cDNAofE.col,i5etwasextractedas fortlle bvPCR In-.Fusion@HD
templateamplificationgene method.Byusing Cloning
that 2.0kb
PPK was clonedintoNcoIsiteofthe resultsshowedtlle
Kit,thegene direetionally pCAMBIAl302vector.『Result]Sequencing
of、PPK wasjtnsertedjntothe vector infrontofeFP ConclusionI砷lefusion
longfragment gene plant.basedexpressionpCAMBIAl302 ge:ne.f
vectorofPPKandGFP were constructed.
expression genes successfufly
wordsEschericMa
coli:PPK vector:Construction
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