Gene-xpert MRTRIF在青海省三南地区耐药结核病诊断中应用.docVIP

精品论文 参考文献 Gene-xpert MRTRIF在青海省三南地区耐药结核病诊断中应用 戴景涛1 卓玛1 张燕2 　　（1青海省第四人民医院 青海 西宁 810001） 　　（2西宁市第一人民医院 青海 西宁 810000） 　　【摘要】目的：探讨Gene-xpert快速检测系统在青南地区（玉树、果洛、黄南）耐多药结核病诊断中的价值。方法：对青海省第四人民医院住院的355例结核病患者（藏族347例、汉族5例、回族3例）的痰、脑脊液、支冲液、胸腹水等标本进行Gene-xpert MRT/RIF系统结核分枝杆菌DNA及利福平耐药性检测。结果：初治患者利福平耐药率4.6%（15/327），复治患者利福平耐药率7.1%（2/28）。结论：Gene-xpert MRT/RIF在青海三南地区耐多药结核病诊断中应用具有较高的临床应用价值，且方法简便、快速。 　　【关键词】Gene-xpert MRT/RIF；利福平耐药；耐多药结核病 　　【中图分类号】R51 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）22-0078-02 　　结核病是由结核分枝杆菌主要经呼吸道传播引起的全身慢性传染病，人群普遍易感。近年来由于初始耐药率增加及人为不规范抗痨治疗，使耐药结核病成为一个严重的全球性公共卫生问题。 　　随着分子生物学诊断技术的发展，新型的分子检测方法利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（Gene-xpert MRT/RIF）试验逐步受到国内外广泛关注。本文探讨基因x-pert MRT/RIF系统在在青南地区（玉树、果洛、黄南）耐药结核病诊断及利福平耐药性检测中的价值 。 　　1.资料与材料 　　1.1 样本来源 　　收集2015年1月～2015年12月在我院住院的355例结核病患者（藏族347例、汉族5例、回族3例）的痰、脑脊液、支冲液、胸腹水等标本。患者年龄在11至84岁之间，男198例、女157例。 　　1.2 仪器与试剂 　　仪器由美国Cepheid公司生产，全名：全自动医用PCR分析系统，型号：GX-XVIR2。试剂名称：Gene-xpert试剂盒。 　　2.实验方法 　　2.1 标本留取 　　痰：患者清晨漱口后用力可出深部的痰液送检； 　　脑脊液：患者入院后抗痨治疗前行腰椎穿刺术送检； 　　支气管灌洗液：对于无痰或者局部有肺不张患者行支气管检查术，灌洗肺泡液送检； 　　胸腹水：对于存在胸水、腹水患者，入院后行胸腹腔穿刺术送检胸腹水。 　　2.2 检测 　　将上述留取标本与含氢氧化钠及异丙醇处理液常规按1:2比例混合，室温静止15分钟，这一操作过程可使样本中的结核分枝杆菌的活性降低106倍，从而使操作的生物危险度降低，再将混合液移至一次性多室样品匣中，置于Gene-Xpert仪器进行全自动检测，约2小时即可读取结果。此外，此反应体系中还包含有1个球芽孢杆菌特异探针作为内对照，以判断DNA扩增效率及检测效率。 　　3.实验结果 　　355例标本中，阳性的130例患者，X-pert检测的敏感度为36.7％（130/355），利福平耐药17例。其中玉树患者敏感度为35.9%（56/156）、利福平耐药7例，果洛患者敏感度42.9%（39/91）、利福平耐药6例，黄南患者敏感度32.4%（35/108）、利福平耐药4例。355例患者中初治患者327例、复治28例。初治患者x-pert检测敏感度35.5%（116/327），利福平耐药15例，复治患者敏感度50%（14/28），利福平耐药2例。对于17例利福平检测阳性患者，按照MDR-TB给予耐药方案抗痨治疗（详见下表）。 　　表 患者检测Gene-xpert MRT/RIF数据汇总 　　* 　　4.讨论 　　本组绝大多数是世居青南地区藏族患者，平均海3000米以上，中青年为主。青海每年约有活动性肺结核患者1.5万，有80%患者分布在农牧区，以青南地区为主，由于化学药物的不合理应用及HIV感染等原因，在基因Xpert检测方法应用之前，我院对于考虑耐药结核病患者，先进行经验性抗痨治疗，根据药敏结果制定抗痨方案，但结核杆菌的培养需要很长时间，且要求标本中含有活菌，目前的药敏试验需要2月左右的时间，不能及时治疗结核感染者。 　　Gene-xpert MRT/RIF系统采用实时荧光PCR技术，以利福平耐药相关rpoB基因，可在2h之内同时检测MRT和RIF耐药，大大缩短了检测时间，使耐多药结核病患者得到及时救治。特别是在一些偏远地区，易于开展，具有明显优势。 　　为何Gene-xpert MRT/RIF检测为利福平耐药，一般可以判断耐多药结核病呢？根据唐神结等主编的《耐药结核病学》，目前