添加外源纤维水解酶对羊草体外瘤胃发酵酶活性及特性的影响研究.pdfVIP

第 22卷 第 1期 草 业 学 报 315— 322 Vo1．22，No．1 ACTA PRATACULTURAE SINICA 2013年 2月 添加外源纤维水解酶对羊草体外瘤 胃 发酵酶活性及特性的影响 庄苏，丁立人，周建国，王恬 (南京农业大学动物科技学 院，江苏 南京 210095) 摘要 ：试验通过分别添加纤维素酶与木聚糖酶 0，10．0与 50．0mg水平 ，0与 24h两个预处理时间，每个处理 3个 重复，体外法评价纤维素酶与木聚糖酶复合处理羊草后与瘤 胃液共培养对木聚糖酶与葡聚糖酶活性及发酵特性的 影响。结果表明，添加纤维水解酶能提高 0与 8h培养液中木聚糖酶和 内切葡聚糖酶活性 以及 0h培养液 中外切 葡聚糖酶活性 ，且具有添加剂量效应 。当培养至 24及 48h，添加外源酶制剂并不能提高培养液中相关酶活性。外 源酶制剂显著增加培养 24与 48h发酵液中乙酸含量 ，8，24与 48h总挥发性脂肪酸产量 (PO．05)以及 48h累 积产气量(PO．05)，但对培养期 内戊酸与异戊酸含量没有影响 (P0．05)。结果提示添加外源酶制剂能提高早 期培养液中木聚糖酶和葡聚糖酶活性、增加VFA产量和改善体外瘤 胃发酵特性。 关键词 ：纤维素酶 ；木聚糖酶 ；挥发性脂肪酸 ；体外试验 中图分类号：$826 文献标识码 ：A 文章编号：1004—5759(2013)01—0315—08 在反刍动物生产中，有关外源酶制剂应用一直存在着不少争议。因为瘤胃内蛋 白质水解菌能分解外源酶(如 植物细胞壁水解酶类)而使之失活_】]，同时瘤 胃微生物能分泌蛋白酶、淀粉酶 、纤维素酶等多种酶类 ，并且各种酶 活性很高_2]，因此无需额外添加外源酶制剂。但是 ，随着酶制剂技术 的发展 ，人们 除了重视外源酶在单 胃动物生 产中应用研究外也开始关注外源酶制剂在反刍动物生产中的应用研究。研究表明，某些纤维素酶 、半纤维酶与蛋 白酶一起培养时能保持稳定酶活，并在瘤 胃内稳定生存 [3；外源酶制剂能够增加瘤 胃微生物在饲料颗粒上的附着 并增加饲料降解率[43；Morgavi等 发现由长梗木霉 (Trichodermazog6r口c^口￡ )产生的酶能与瘤 胃内酶一 起协 同地从玉米(Zeamays)青贮中释放更多的还原糖 ；同样外源纤维水解酶能改善动物生产性能_6]。即便如 此，外源酶制剂在反刍动物生产应用研究还不够深入 ，对其作用机理认识还不够全面 。就 目前研究现状而言，更 多研究集 中在外源酶制剂如何处理粗饲料 (如作为青贮饲料添加剂)上_8’。]，有关外源酶制剂的处理时间、添加剂 量以及外源酶对内源酶活性的影响研究相对较少 ，国内在这方面研究仅处于起步阶段。本试验以羊草为底物 ，利 用体外法研究不同剂量纤维酶与木聚糖酶、不 同处理时间与瘤 胃液共培养对发酵液中纤维素酶与葡聚糖酶活性 与发酵特性的影响，旨在为丰富外源纤维水解酶在反刍动物 中的应用提供一些理论依据 。 1 材料与方法 1．1 试验材料与时间 酶制剂为国产纤维素酶(40000U／g)与木聚糖酶(42000U／g)产品。使用时，用去离子水配制成各含 1O与 50mg／mL纤维素酶与木聚糖酶混合酶液 。发酵底物为羊草 (Aneurolepidiumchinense)草粉。试验于 2009年 10月在南京农业大学动物科技学院反刍动物营养研究室进行。 1．2 瘤 胃液采集 选取 5只体况 良好 、体重 35～4Okg装有永久瘤胃瘘管的本地阉割山羊用于瘤 胃液供体。试验羊圈养 ，适量 补饲精料 (玉米 ：豆粕一7：3)，自由采食青干草与饮水 。瘤 胃液采集当日，在饲喂后 2h，经瘤胃瘘管分别从 5头 山羊的瘤 胃腹囊下部抽取含 内容物的瘤 胃液，放入经 39℃预热并充满 CO 的保温瓶中，立即返回实验室，用 4层 收稿 日期 ：20l2一O7—03；改回 日期 ：2012—10—15 基金项 目：农业部结构调整重大技术研究专项)资助。 作者简介 ：庄苏 (1961一)，男，江苏江都人，副教授 ，博士。E—mail：