对药“知母黄柏”的正交提取工艺研究.docVIP

精品论文 参考文献 对药“知母黄柏”的正交提取工艺研究 赵维扬1 邓洁雄2 吴晓薇1 周海玲1 　　（1广东省中医院药学部 广东 广州 510120） 　　（2广州市药品检验所四分所 广东 广州 510405） 　　【摘要】 目的：研究对药知母、黄柏的最佳提取工艺。方法：以知母、黄柏为原料，盐酸小檗碱的含量及出膏率加权为评价指标，采用单因素实验与L9(34)正交实验相结合的方法化选出对药知母、黄柏的最佳提取工艺。结果：80 %的乙醇水溶液是对药知母、黄柏的最佳提取溶媒，最佳的提取工艺是10倍量80%的乙醇水溶液热回流提取3次每次3小时。结论：10倍量80%的乙醇水溶液热回流提取3次每次3小时所得样品中盐酸小檗碱含量出膏率最佳。 　　【关键词】 黄柏；知母；盐酸小檗碱；提取工艺；正交试验 　　【中图分类号】R243 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2015）24-0291-03 　　“药有个性之特长,方有合群之妙用”,中药通过配伍组成方剂,或可以提高与改变疗效,或可以减低毒性与副作用,以适应复杂多变的病情,是临床治疗疾病的主要形式。中药的配伍应用是祖国医学的优势所在,配伍理论也体现了中医药理论的重要特色。配伍理论涉及较广,“君臣佐使”、“七情合和”,随着时代的进步,对配伍理论的研究和方剂配伍规律的深入探讨,日渐引起学术界的高度重视。 　　中药配伍应用是中医药学的优势之一,配伍理论也是中医基础理论之一、是中医药应用的重要特色。中药配伍后可以使有效成分在数或量上得到增加，从而取得更佳的临床疗效[1,2]。药对，又称对药，特指临床用药中常用的、相对固定的两味药物的配伍形式，是中药配伍方法的精髓[3]。知母和黄柏是临床常用的清虚热药对之一。本文就该药对的提取工艺进行优化研究。 　　1.仪器与材料 　　1.1 仪器 　　LC-20AT型高效液相色谱仪，日本岛津公司产品；KQ-300B型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；HH-2型数显恒温水浴器，河南石予华仪器有限公司；RE-52AA型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；Y4W1103型远红外恒温干燥箱，天津市华北实验仪器有限公司；KDM型调温电热套，山东省邺城永兴仪???厂。 　　1.2 材料 　　知母，黄柏购自安国药材市场；盐酸小檗碱，中国药品生物制品鉴定所（批号：110713-200911）；甲醇、乙腈均为色谱纯，天津市康科德科技有限公司，氢氧化钠、冰乙酸、95%的乙醇水溶液、磷酸为分析纯，天津市北方天医化学试剂厂。 　　2.方法与结果 　　2.1 标准品溶液的制备 　　取盐酸小檗碱对照品适量,精密称定，加入流动相（乙腈：0. 1%磷酸水 50:50），制备成0.10mg∕ml的对照品溶液，用0.45mu;m有机微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 　　2.2 供试品的制备 　　取本品黄柏粉末（过三号筛）约0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，用80ml流动相（乙腈：0.1%磷酸水= 50:50）超声处理（功率 250W，频率40kHz)40min，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45mu;m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 　　2.3 色谱条件与检测方法 　　色谱柱：SinoChrom ODS-BP（4.6*250mm，5mu;m）；柱温：室温；流速：1.000ml/min；进样量：10mu;l，检测波长:260nm,流动相：采用梯度洗脱，见表1。 　　表1 流动相梯度 　　时间（min） 乙腈 0.1%磷酸水（NaOH pH3.0） 　　0 10 90 　　10 30 70 　　15 35 65 　　2.4 方法学考察 　　2.4.1专属性试验 分别将盐酸小檗碱对照品溶液、样品溶液和黄柏阴性溶液按2.3色谱条件进样，记录色谱图，结果见图1-3，由色谱图可知黄柏阴性无干扰，该分析方法适合盐酸小檗碱的含量测定。 　　2.4.2精密度试验 取同一对照品溶液，按照2.3色谱条件进样，于24 h内连续测定6次，测定盐酸小檗碱峰面积，计算RSD=0.23 %，结果表明盐酸小檗碱精密度良好。 　　2.4.3标准曲线的制备 取盐酸小檗碱对照品溶液，分别以1、2、4、6、8、10mu;l为进样量，用2.3色谱条件测定的峰面积峰值，进行回归处理计算的标准曲线方程是y=5472736.04x-75029.52 （r=0.9999）。结果表明峰面积与盐酸小檗碱质