HPLC-ELSD法测定肾康宁胶囊中黄芪甲苷的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC-ELSD法测定肾康宁胶囊中黄芪甲苷的含量 吴良发1* 周敏2 吴燕红1 吴毅1 (1江西省食品药品检验所 江西南昌 330029；2江西省药物研究所 江西南昌 330029) 【中图分类号】R284 【文献标识码】B【文章编号】1672-5085(2013)05-0370-02 【摘要】 目的 建立HPLC-ELSD法测定肾康宁胶囊中黄芪甲苷的含量。方法 采用Diamonsil C18 (4.6 mmtimes;250 mm，5mu;m) 色谱柱；以乙腈-水(35:65)为流动相；流速1.0mLbull;min-1；柱温30℃；漂移管温度105℃；气体流速2.5L/min。结果 黄芪甲苷在0.404～12.12 mu;g范围内呈良好的对数线性关系(r=0.9999)，平均回收率(n=6)为95.3%。结论 该方法简便、准确，重复性好，可作为肾康宁胶囊的质量控制方法。 【关键词】 肾康宁胶囊 HPLC-ELSD法 黄芪甲苷 肾康宁胶囊由黄芪、丹参、茯苓、泽泻、益母草、淡附片、锁阳、山药共8味中药组成，具有温肾、益气、活血、渗湿之功效。黄芪是君药，其主要的活性成分之一是黄芪甲苷[1]，但肾康宁胶囊现行标准(国家食品药品监督管理局标准YB未对黄芪甲苷进行定量控制。本文参考有关文献[2～4]，采用HPLC-ELSD法对肾康宁胶囊中黄芪甲苷进行定量分析。结果表明该法简便、准确、重现性好，可作为该品种的质量控制方法，尚未见文献报道。 1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪，Alltech ELSD 2000蒸发光散射检测器。 黄芪甲苷对照品(批号:110781-200613，中国药品生物制品检定所，含量测定用)；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。 2 溶液制备 2.1 对照品溶液 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成浓度为0.4mg/ml的溶液，即得。 2.2 供试品溶液 取装量差异项下的本品内容物，研细，取约4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率25kHz)30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣加水50ml分次溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次50ml，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至5ml量瓶中??加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 2.3 阴性样品溶液 取缺黄芪阴性样品，按照供试品溶液制备方法制备,即得。 3 色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18柱(4.6mmtimes;250mm,5mu;m)；流动相:乙腈-水(35:65)；流速:1.0mLbull;min-1；柱温:30℃。漂移管温度:105℃；载气流速:2.5L/min。 进样量10mu;L。在上述色谱条件下，对照品、样品及阴性样品色谱图见图1。 图1 对照品(A)、样品(B)、阴性样品(C)色谱图 4 线性范围 分别吸取对照品溶液适量，用甲醇配制成浓度依次为0.0404、0.202、0.404、0.808、1.212mg/ml的系列溶液，分别取10mu;L，注入高液相色谱仪，测定，以对照品进样量X(mu;g)的常用对数值为横坐标，峰面积Y的常用对数值为纵坐标，进行线性回归分析，回归方程为:lgY=1.3159lgX+5.8336，r=0.9999。 结果表明黄芪甲苷在0.404～12.12mu;g之间呈良好的对数线性关系。 5 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10mu;L，按上述色谱条件连续进样6次，测定峰面积，结果RSD为1.8%，表明仪器精密度良好。 6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液10mu;L，分别在0，6，12，18，24h各进样2次，以峰面积平均值计算，结果RSD为0.8%，表明供试品溶液在24h内基本稳定。 7 重复性试验 按“2.2”项下方法制备6份供试品溶液，分别精密吸取10 mu;L，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进样测定，结果含量平均值为0.4714mgbull;g-1，RSD为2.1%。 8 加样回收率试验