HPLC法测定抗热镇痉丸中的绿原酸含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定抗热镇痉丸中的绿原酸含量 辽宁省阜新市药品检验所 123000 【中图分类号】 Ｒ284.1 【文献标识码】 A　　 【文章编号】 1550-1868（2016）6 [摘要]目的：通过实验建立抗热镇痉丸中的绿原酸含量测定方法。方法：使用HPLC法测定抗热镇痉丸中的绿原酸含量，进行方法考察。结果：在选定的色谱条件下, 供试溶液中绿原酸与相邻组分分离度良好,阴性液无干扰。方法的重复性、稳定性、精密度、回收率试验均符合有关规定, 3批样品中绿原酸含量分别为 0.44、0.47、0.46mg /丸。结论: 采用 HPLC法可以作为抗热镇痉丸中绿原酸的含量测定方法。 [关键词]高效液相色谱；抗热镇痉丸；绿原酸；含量测定 抗热镇痉丸是以十一味药物，除鲜地黄、鲜石菖蒲、淡豆豉外，其余天花粉等八味粉碎成细粉，过筛，混匀；鲜地黄、鲜石菖蒲压榨取汁，滤过；淡豆豉粉碎成细粉，制成稀糊，加入上述滤汁，混匀；与为粉末制成丸，低温干燥，即得。其具有清热解毒之功效。临床上用于湿温暑疫，高热不退，痉阙昏狂，谵语发斑等疾病的治疗。本次研究主要是通过实验建立抗热镇痉丸中的绿原酸含量测定方法。方法如下所示。 1仪器与试剂 仪器: 液相色谱仪（日本岛津LC-10AT,SPD-10AV检测器)，色谱柱：（InertSustain-C18柱(4. 6mmX 150mm,5mu;m)）试剂: 乙腈为色谱纯, 其它为分析纯。 2 实验用品 绿原酸对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号：:110753-201314）；流动相所用乙腈为北京四友化学试剂厂色谱纯；水为纯化水；其他试剂均为分析纯。抗热镇痉丸（批号20150524，厂家：菏泽生物制药厂）。 2 实验方法 2.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅胶键合相硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液（10：90）为流动相 ；柱温：30℃；检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计应不低于4000[1]。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1mL含40mu;g的溶液，即得(10℃以下保存)。 2.3 供试品溶液的制备 取本品10丸，取约1 g，精密称定，置100mL量瓶中，加入甲醇约80mL，超声处理10min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，离心（2000r/min）5min，取上清液至棕色量瓶中，即得[2]。 2.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20mu;L，注入液相色谱仪，测定，即得。 2.5 阴性干扰试验 取除去金银花提取物以外的其它药材，按样品制备方法制成阴性液[3]。 2.6 线性范围考察 精密称取绿原酸对照品8.62mg，置100mL棕色量瓶中，加甲醇溶解，加甲醇至刻度，摇匀，制成每1mL含0.0862mg的溶液，分别精密吸取2、4、6、8、10mL溶液置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，分别取上述5种溶液10mu;L， 注入液相色谱器仪中，测定色谱峰面积 [4]。结果得出，以进样量为横坐标,色谱峰面积为纵坐标, 回归方程为: Y = 1441233X+8639.5,r= 0.9999。由测定结果提示, 绿原酸进样量在0.1788- 0.8626mu;g范围内线性关系良好。 2.7精密度试验 精密吸取同一对照品溶液20mu;l，连续进样5次，分别测得峰面积，RSD=0.5%。 2.8稳定性试验 精密吸取上述供试品溶液20mu;l，于2h、4h、6h、8h、10h后测定峰面积的RSD=0.8%，表明供试品溶液至少在10h内稳定。 2.9加样回收率试验 取已测知含量的样品(绿原酸含量为0.45mg/丸)适量研细，分别取约1g，共6份，精密称定，分别精密加入三个不同浓度的对照品溶液(浓度为:0.3957mg/mL、0.2455mg/mL、0.1323mg/mL) 5mI及甲醇45mL测定含量，所得加样回收率RSD=0.3%、0.5%、0.3%） 2.10重复性试验 精密量取同一样品5份，照上述操作，结果得绿原酸峰面积的 RSD为0.60%。n=5表明本法重复性好。 3含量测定结果 在选定的色谱条件下, 供试溶液中绿原酸与相邻组分分离度良好,阴性液无干扰。方法的重复性、稳定性、精密度、回收率试验均符合有关规定, 3批样品中绿原酸含量分别为 0.44、0.47、0.46mg /丸。 3讨论 本次研究主要是探讨通过实