乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA和HBeAg的相关性分析.docVIP

精品论文 参考文献 乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA和HBeAg的相关性分析 王 敏 (黑龙江省大庆油田总医院集团龙南医院 163453) 【中图分类号】R512.6+2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）32-0249-02 既往研究中显示前S1抗原主要存在于血清HBV表面，前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg检测率高度符合，是一项十分重要的病毒复制指标，可作为HBeAg和HBV-DNA检测的补充和对照。本实验通过荧光定量PCR检测HBV-DNA及用酶联免疫法(ELISA)检测HBeAg，Anti-HBe及前S1抗原，对前S1抗原与HBV-DNA，HBeAg进行相关性分析，探讨前S1抗原在乙型肝炎病毒检测中的意义。 1 材料和方法 1.1对象 本组对象为在我院治疗的207例乙型肝炎患者，乙肝表面抗原(HB-sAg)阳性，年龄12～70岁，中位年龄42岁。对照组为80例健康体检者，年龄22～60岁，中位年龄40岁，乙型肝炎病毒标志物均为阴性。且ALT，AST水平在正常范围内。 1.2标本采集 空腹下取静脉血3 mL，3000 r／min离心10 min，分离血清检测用。 1.3仪器和试剂 采用深圳匹基生物工程有限公司的HBV-PCR荧光定量检测试剂盒，用Roche Light Cycler荧光PCR检测仪检测HBV-DNA；用上海科华生物有限公司提供的试剂盒检测HBeAg、Anti-HBe；用上海复星长征医学科学有限公司提供的试剂盒检测前S1抗原。 1.4检测方法 1.4.1 HBV-DNA的检测 HBV-DNA采用实时荧光定量PCR法检测。①标本处理。②扩增试剂制备及加样：HBV-PCR反应液、Taq酶及VNG。③PCR扩增：扩增产物与特异的寡核苷酸探针进行杂交。④测定与探针结合的扩增产物，测定的线性范围为1.0times;103～5.0times;107copies／mL，若检测标本大于5.0times;107copies／mL，报告为gt;5.0times;107copies／mL。 1.4.2 前S1抗原、HBeAg、Anti-HBe的检测：采用酶联免疫法。 1.4.3 80名乙肝病毒标志物均为阴性的健康人血清再测前S1抗原。 1.5统计学方法 采用SPSS11.0软件进行相关统计学分析。两种标志物的显著性关联性采用配对资料的X2检验。 2 结果 2.1 前S1抗原与HBeAg相关分析 在HBV-DNA阳性的患者中，HBeAg阳性、Anti-HBe阴性的血清中，前S1抗原的阳性率占69.5％；Anti-HBe阳性、HBeAg阴性的血清中，前S1抗原的阳性率占61.5％，两组经X2检验，差异无统计学意义(Pgt;0.05)见表1。 表2 207例HBV-DNA阳性与HBeAg、前S1抗原相关分析 从表2可以看出，HBsAg阳性、HBeAg阳性、Anti-HBe阴性的患者HBV-DNA的拷贝数一般在107及107cpoies／ml以上。而在HBV-DNA的低拷贝(103～106copies／ml)中，前S1抗原的阳性率要明显高于HBeAg的阳性率，经X2检验，Plt;0.05，具有统计学意义，提示对无条件检测HBV-DNA而HBeAg阴性的血清，检测前S1抗原，可对乙肝病毒的复制起到补充作用。 2.2对照组前S1抗原检测结果 80名乙肝病毒标志物均为阴性的健康人血清前S1抗原结果均为阴性。 3 讨论 HBV外膜蛋白包括S、前S2和前S1 3种成分，前S1蛋自在病毒侵入肝细胞中起重要作用，含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上，前S1蛋白在病毒感染、装配和刺激机体产生免疫反应等方面起十分重要的作用。从表l可以看出，HBeAg阳性、Anti—HBe阴性的血清、HBeAg阴性、Anti— HBe阳性的血清前S1抗原的阳性检出率相似，两组经X2检验，差异无统计学意义(Pgt;0.05)与文献报道一致。说明前S1抗原与HBeAg无明确的相关。 目前临床上用于评估HBV复制的指标主要有HBV-DNA和HBeAg。HBeAg与HBV DNA含量呈正相关，HBeAg阳性表示HBV活动性复制，提示完整病毒颗粒存在。虽然定量PCR法检测HBV-DN