抗生素类药物的分析(修改版).ppt

Your company slogan LOGO  第十一章 抗生素类药物的分析 Analysis of antibiotics 主要内容 1 概述 2 β-内酰胺类抗生素的分析 3 氨基糖苷类抗生素的分析 4 四环素类抗生素的分析 抗生素类药物中高分子杂质的检查 5 Your company slogan 在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称 β–内酰胺类 氨基糖苷类 四环素类 大环内酯类 多烯大环类 多肽类 1. 抗生素（antibiotics） 2. 分 类 一、概 述 3.特点 三多: 1)同系物多 2)异构体多 3)降解产物多 纯度低 菌株,发酵条件改变 质量将改变 活性变异 结构中醛基稳定性关 稳定性差 纯度低 稳定性差 Your company slogan 采用生物学法与物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时 理化方法： 准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差 4. 抗生素质量分析 1. 抑菌试验 二、鉴别 2. 沉淀反应 过量HCl 有机溶剂 溶解 4. Na+、K+的火焰反应 K+ 火焰 → 紫色 Na+ 火焰 → 鲜黄色 3. 水解反应 NaOH 水解 5. UV法 青霉素Ⅴ钾 λmax=268、274nm A268/A274=1.20~1.25 6. HPLC法 头孢羟氨苄 与对照品比较 tR 值 对照品法 7. IR β－内酰胺环上的羰基伸缩振 动增强而向高波数方向位移 β-内酰胺环 仲酰胺 三、特殊杂质的检查 主要特殊杂质：高分子聚合物，有关物质，异构体 　　　　方法： HPLC法, 控制杂质吸光度法 (一)聚合物 流动相：水溶液或缓冲液，　可加入适量有机溶剂（30％） 　　 流速：　0.5-1.0ml/min 药物分子的单体与其二聚体不能达到基线分离时： 　　　　Ｒ＝　 色谱柱: 亲水硅胶,凝胶或经修饰凝胶 (葡聚糖凝胶Sephadex和聚丙烯酰胺凝胶Sepharose) 二聚体的峰高 单体与二聚体之间的谷高 ＞２ 三、特殊杂质的检查 头孢他啶中头孢他啶聚合物的测定－－－外标法 流动相：含3.5%硫酸铵的pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液 （0.1mol/L磷酸氢二钠溶液－0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（６１:３９） 　流动相Ｂ：水 　 流速：　0.８ml/min　　λ=254nm 头孢拉啶对照溶液：１００μg/ml 　　　　 色谱柱: 葡聚糖凝胶Ｇ－１０（40－120μm） 三、特殊杂质的检查 有关物质： 供试品：０.25mg/ml 对照液：0.0025mg/ml 如有杂质峰 SE1+2 ＜ 1% S△3 ＜ 1.5% S其 ＜ 0.5% S合 ＜ 3.0% 异构体: 供试品: ０.25mg/ml S头孢呋辛酯Ａ异构体：ＳＡ＋Ｂ ＝ 0.48-0.55 　 色谱图分析: 第三节氨基糖苷类抗生素的分析 Your company slogan 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 Your company slogan 一. 化学结构 都是以氨基环醇与氨基糖缩合而成的苷； 分子结构中都含有多羟基； 均为碱性抗生素； 链霉素 二、鉴别反应 1. 茚三酮反应 △ 蓝紫色 2. N—甲基葡萄糖胺反应 乙酰丙酮 OH- 吡咯衍生物 对二甲氨基苯甲醛 H+ 红色 3. 麦芽酚反应 链霉素中链霉糖的特征反应 △ H+ 紫红 4. 坂口反应 链霉素中链霉胍的反应 水解 橙红色 次溴酸钠 8-羟基喹啉 （或α- 萘酚） 三、特殊杂质检查及组分分析 (一)　链霉素中链霉素B的检查 链霉素B---甘露糖链霉素 　　　链霉素Ｂ　是发酵中由菌种产生的，其活性仅为链霉素的２０－２５％，水解后可产生甘露糖和链霉素。 检查方法：薄层色谱法 限度: 小于3.0%. 　　　　　　　　　　　硫酸－甲醇 　供试