苦马豆素的免疫原性及抗肿瘤研究进展.pdfVIP

苦马豆素的免疫原性及抗肿瘤研究进展+ 陈绍淑’赵宝玉1高睿2李蓉1黄光东3 1．西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100；2．扬凌职业技术学院动物工程系712100： 3．-农dk部动物检疫所266032) SW主要是通过抑制溶酶体a．甘露糖甙酶I和高尔基氏体a．甘露糖甙酶II的活性使家畜中毒。除了研究 SW的毒性外，学者们还根据其可抑制n．甘露糖甙酶的活性，对其抗肿瘤活性进行了研究，发现其可抑 制肿瘤细胞的转移和实体瘤在小鼠和肿瘤患者身上的生长，刺激宿主的免疫系统，增强免疫细胞对肿瘤 的杀伤活性。近来又有人从免疫学角度研究了SW的免疫原性．本文主要对SW的免疫原性及抗肿瘤活 性进行了综述。 关键词：苦马豆素；免疫原性；抗肿瘤 自从1893年美国首次发现疯草中毒后，许多学者对疯草的有毒成分(疯草毒素)进 行了大量的研究，直到1979年澳洲学者Colegate等…从灰苦马豆中分离出苦马豆素 士提供的SW为标准品，从斑荚黄芪和绢毛棘豆中分离出吲哚里西啶生物碱，从而证明疯 草毒素就是吲哚里西啶生物碱。我国在这方面的研究起步较晚。曹光荣等91从黄花棘豆中 分离到SW，黄有德等”l从变异黄芪中分离到SW，童德文等”1从甘肃棘豆中分离到SW。 国内杨鸣琦【B】，童德文”1等从豆科植物上分离保存的丝核菌中也分离到SW。当家畜采食含 苦马豆素的疯草后，其中毒症状以神经系统紊乱最明显，主要表现精神沉郁，共济失调， 消瘦，头部震颤，反应迟钝，目光凝视，后肢麻痹，卧地不起，最终因衰竭而死；组织学 检查及靶器官表现细胞浆空泡变性，组织细胞中溶酶体糖甙酶和血浆水解酶水平降低，组 织中低聚糖明显增加““。除对SW的毒理机制进行了研究外，还对其药用价值也进行了研 究，现已证明SW可作为免疫调节荆、肿瘤转移及扩散抑制剂、抗病毒和细胞保护剂等药 物使用㈨”I。 1 SW的免疫原性 有关植物毒素免疫用于动物中毒性疾病的发病机理、诊断、预防和治疗是临床毒理学 研究的全新的交叉性领域，在国外也是刚刚起步，仅见的几篇报道是，免疫法防治植物雌 激素毒性的作用[131，免疫法预防马缨丹毒素中毒n4。1”，免疫法预防羽扇豆中毒‘“1。由于 SW的分子量小(173)，只能作为半抗原，不具有免疫原性，只有连接到大分子载体蛋白 ·作者简介：陈绍淑(1976一)，女，四川省大竹县人，西北农林科技大学动物科技学院临床兽医学 2001级硕士研究生。主要从事有毒植物毒性成分的提取分离及其药用研究。联系方式：029+7092429， 上才能导出其免疫原性u71。为了避免大分子蛋白对SW分子的屏蔽作用，选择了SW先与 用溴乙酸制备的活性酯反应，生成季铵盐，后再与蛋白质反应，这样在半抗原(sw)与 蛋白质(BSA)之间提供了一个含有碳原子的“桥”，达到避免屏蔽的功效。童德文等 (2001)”8】用溴乙酸制备的活性酯与SW反应，产物真空干燥后得到白色粉末状物，产率 为77％。经MR、IR鉴定和元素分析的结果判定，白色粉末状物为SW．活性酯结合的季 铵盐。季铵盐再与大分子载体蛋白中血清白蛋白(BSA)反应，产物经透析，冻干后呈白 色针状结晶，按BSA计算，产率为61％。考虑到SW上的-OH可能是半抗原的抗原决定 簇，结合位点选择在N4原子上，N4原子与蛋白质结合后不影响，且远离了半抗原的抗原 决定簇，易于产生高特异性的抗血清。此实验合成出来的SW-BSA的结合率，经测定平均 每个BSA分子上结合了18．17个季铵盐分子，也就是说平均每个BSA分子上结合了18．17 个SW，按照白蛋白上的60个游离氨基团，其中必须有15—20个以上的游离子氨基团与半 抗原结合，才可以诱导出半抗原的免疫原性””的原则来判断，SW-BSA可以诱导出SW的 抗原性。随后，童德文等(2001)唧1用SW．BSA为免疫原接种兔子。获得了兔抗SW的 抗血清。应用间接血凝试验和间接ELISA试验检测抗体，结果表明，SW的免疫学检测方 法，将具有特异性强，灵敏度高，操作方便的优点，不但可用于疯草的化学分类研究，而 且可用于检测这些植物在哪个生长期SW含量最高，查明各种家畜对SW的耐受剂量，研 究SW的作用机理，并对人类食品进行常规检查。虽然获得了兔抗BSA的抗血清，但 SW-BSA能否保护动物在采食疯草时免于中毒，有待证实。 2SW的抗肿瘤研究 SW是高尔基氏体a．甘露糖甙酶Ⅱ，但不是a-甘露糖甙酶I的抑制剂，o-甘露糖甙 I-3．和a SW也抑制溶