Troglitazone抗人前列腺癌PC3细胞作用及机制研讨.pdfVIP

Tro litaz g 摘要 背景与目的： 激素非依赖性前列腺癌临床治疗效果欠佳。过氧化 物酶体增殖物激活受体(PPARs)是一类配体依赖的序列特异的核转录因 1itaz 子。Trog one为一种噻唑烷二酮类药物，是PPAR—Y的人工合成配 itaz 体。前期工作已显示TroglOne对肿瘤细胞有抑制增殖的作用，但 具体作用机制尚不明确。本研究以人前列腺癌PC-3细胞为靶细胞，采 用体外培养细胞(体外实验)及建立裸鼠模型(体内实验)方法从分子 litaz 水平、细胞水平及动物整体水平探讨Trog one的抗肿瘤活性及其 作用机制。目的为新型前列腺癌药物的研发提供理论基础。 方法：体外实验：体外培养人前列腺癌PC-3细胞，采用MTT比色 11 Sternbl swe 法、流式细胞术、We 0t、RT-PCR、免疫组织化学、Tran it 小室、细胞划痕试验等方法，观察Tr091azone对前列腺癌细胞增殖、 凋亡和侵袭的影响，探讨细胞内信号转导机制。体内实验：培养前列腺 litaz 癌PC-3细胞接种裸鼠，建立荷瘤裸鼠模型，观察Trogone对荷瘤 litaz 裸鼠移植瘤生长的抑制情况，检测Trog one处理后瘤组织内 Bc litaz one体内的抗肿 l-2／Bax及活化caspase一3的表达，探讨Trog 瘤活性及其作用机制。 1it 结果：体外实验：MTT比色结果显示Trogazone能抑制前列腺 癌细胞增殖，流式细胞术检测GO-G1期细胞明显增多，且呈显著量效和 时间依赖关系。而PPARY受体特异性抑制剂GW9662未能逆转 1itaz swe Trog one的抑制细胞增殖作用；细胞划痕实验、Tran11小室检 1i 测显示Trog litaz 细胞术检测显示Trog one作用前列腺癌细胞后，细胞凋亡率明显 ernb1 litaz 升高；RT-PCR和WeSt0t结果显示随Trogone浓度增加， Bc1-2 mRNA和蛋白表达均下降、而BaxmRNA和蛋白表达无变化， Bc Sternbl 1-2／Bax比值下降；流式细胞术及We0t检测到随着 itaz Tr091one浓度的增加，线粒体膜电位下降、caspase一3的活化率逐 bl ern 渐增加，WeSt 0t进一步检测到caspaSe-3的下游底物ICAD被降 litaz 解；进一步探讨细胞内信号通路显示随Trog one浓度增加，EGFR， ERK li 1／2，PI3K，AKT蛋白表达逐渐减少，而Trogtazone对EGF