大蒜提取物二烯丙基化三硫对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响.pdfVIP

内蒙古医学院学报 2010年4月 第32卷 第2期 · 77 · · 论 著 · 大蒜提取物二烯丙基化三硫对人膀胱癌 T24细胞凋亡的影响 王云彬 ， 谢立平 ， 秦 杰 ， 郑祥毅 ， 白 宇 ， 杨 凯 (1．内蒙古医学院附属医院 泌尿外科 ，内蒙古 呼和浩特 010050； 2．浙江大学医学院附属第一 医院 泌尿外科) 摘 要：目的：研 究大蒜提取物二烯丙基化三硫 (diallyltrisulfide，DATS)在体外对 T24细胞凋亡的诱导作 用，并探讨其诱导凋亡的分子机制。方法：应用荧光染色形态学观察DATS作用后T24细胞凋亡形态学改变。 并应用流式细胞仪检 测细胞 凋亡率 的变化。采 用蛋 白质印迹法检测 不同浓度 DATS作 用后 T24细胞 中 caspase一3、PARP蛋 白的表达 ，并进一步研究其分子机理。结果：DATS可明显诱导T24细胞细胞凋亡并呈显著 剂量依赖性。DATS作用于T24细胞后，proeaspase一3表达减少，同时出现PARP的裂解片段 ，并呈显著的剂量 依赖性。DATS作用于T24细胞后，P—PDK1，P—Ser473一Akt的表达逐渐降低 ，呈剂量依赖性，但 t—Akt的表 达不受影响。DATS作用于T24细胞后，Bax表达逐渐增高，Bcl一2的表达逐渐降低，呈显著的剂量依赖性。结 论：DATS能诱导T24细胞凋亡，凋亡的诱导作用呈显著剂量依赖性。DATS诱导产生凋亡的机理可能通过抑制 T24细胞PI3K／Akt信号通路的激活从而调节Bcl一2家族蛋 白，并最终诱导凋亡发生。 关键词 ：膀胱癌 ；凋亡；二烯丙基化三硫 ；PI3K／Akt；Bcl一2 中图分类号：R737．14 文献标识码：A 文章编号：1004～2l13(2010)02—0077一O5 EFFECTSoF GARLIC —DEIUVED DATSoN APoPTOSIS0F HUMAN BLADDER CARCINoMA T24CELLS WANGYun—bin， XIELi—ping， QINJie， eta1． (DepartmentofUrology，AffiliatedHospital，InnerMongoliaMedicalCollege，Hohhot010050China) Abstract：0bjective：ToinvestigatetheeffectsofDATSonapoptosisofT24cellsandidentifythe alteredsignalingpahtwayunderlyinghteresponsetoDATSexposure．M ethods：Theinductionofapop— tosisbyDATSwasmeasuredbyacridineorange／ehtidium bromideassays．Theextentofapoptosiswas quantifiedbyflow cytometricanalysis．Alterationsinsignalingeventsweredeterminedinwesternblo— tingprobingforaktproteins．Theroleofcaspase一3，PARP，Bcl一2familyinapoptosiswasanalysed bywesternblotting．Results：UsingtheT24 human bladdercancercellline，DATStreatmentwasre— sultedininductionofapoptosisindose——dependentmanner．Westernblotingindicatedthatrteatment ofT24cellswithDATSwasresultedinadose——dependentactivationofprocaspase——3andPARPpro。。 teinsafterDATStreatment．DATStreatmentwasresultedinanappreciabledown—regulationofprot