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SouthMed ·589·
2008；28(4) 南方医科大学学报(J Univ)
周军，李建明，杨发达，柳玉红，丁彦青(南方医科大学南方医院病理科，南方医科大学病理学教研室，教育部广
东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室，广东省分子肿瘤病理重点实验室，广东广州
510515)
在大肠癌转移中参与的信号转导机制提供研究基础。方法利用在线软件设计人CDH22基因shRNA序列，合成、退火
形成双链寡核酸后克隆到pENTRm／U6载体的黏性末端，测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组，获得真核
表达慢病毒干扰载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助质粒和CDH22基因重组慢病毒载体导入293FT细胞包装
病毒，测定病毒滴度，感染大肠癌细胞SW480，杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰CDH22基因的细胞亚系。结果成功构建
胞克隆1l中CDH22
CDH22基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系．为研究CDH22在大肠癌转移中的作用机制提供了研究基础。
关键词：CDFl22：RNA干扰；慢病毒；结直肠癌
中圈分类号：R322文献标识码：A 文章编号：167324254(2008)04．0589．04
ConstructionofalentiviralvectorforRNAinterferenceofhumanCDH22andits
gene gene
effectinSW480cells
silencing
ZHOU
Jun，LI Fa-da，LIU
Jian-ming,YANGYu—hong，DINGYan—qing
Medical
DepartmentofPathology,NanfangHospital，SouthernUniversity,Guangzhou510515，China
Toconstructalentiviral vectorforRNAinterferenceofhumanCDH22 assessits
Abstract：0bjective expression gene．and
effectincolorectalcancercellsto abasisfor theroleofCDH22inthe
genesilencing provide investigating gene signaling
humancolorectal Human
involvedin carcinomametastasis．MethodsCDH22short
pathway gene hairpinRNA(shRNA)
was asoftwareavailableon—line．Afterand double-stranded
synthesis
sequencedesignedusing annealing，the oligonucleotides
intothe followed wassubclonedinto
cloned clone
(dsOligoe)werepENTRaWU6plasmid bysequenceanalysis．Apositive
vectorandtransformedin
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