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·1864·
[文章编号】 1000．4718(2013)10-1864—06
·实验技术·
人EGFL7基因RNA干扰慢病毒载体的
构建及其在人喉癌细胞中的表达水
张革化， 常利红， 叶进， 庄士民， 王凯， 黎景佳△
(中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科，广东广州510630)
factor-likedomain
[摘要]目的：构建人表皮生长因子样结构域7(epidermalgrowth 7，EGFL7)基因RNA干
扰(RNA
真核表达慢病毒干扰载体。在POLOdelivererTM3000介导下将慢病毒包装质粒和EGFL7基因重组慢病毒载体导入
293T细胞包装病毒，测定病毒滴度，感染人喉癌细胞HEp-2，杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰EGFL7基因的细胞亚
系。结果：成功构建EGFL7
为5x EGFL7基因的沉默
10“TU／L，实时荧光定量PCR证实pLenti6．3-EGFL7．miR慢病毒载体对喉癌细胞HEp-2
效率为97％。结论：成功构建人EGFL7基因特异性的慢病毒干扰载体，并获得EGFL7基因稳定干扰的喉癌细胞
亚系。
[关键词]EGFL7蛋白；RNA干扰；喉肿瘤；慢病毒
[中图分类号]R363 [文献标志码]A
ConstructionofalentiviralvectorforRN入interferenceofhumanEGFL7
anditsstable inhuman carcinomacells
gene expression laryngeal
ZHANG
Ge—hua，CHANGLi-hong，YEJin，ZHUANGShi—min，WANGKai，LI
Jing-jia
(DepartmentofOtorhinolaryngology-HeadNeck SunYat—SER
Surgery，the觋砌AffiliatedHospitalof University，Guang-
zhou
510630，China．E-mail：li-ji,涮a@hotmail．corn)
AIM：To theroleof factor-likedomain the
[ABSTRACT]investigate epidermalgrowth 7(EGFL7)inpathogene-
sisand of carcinomavia alentiviral vectorforRNA hu-
laryngeal interference(RNAi)of
progress constructingexpression
manEGFL7and the effectofthevectorinhuman
gene assessinggene—silencing laryngealepidermoidcarcinoma(HEp-2)
RNAi were focusedonhumanEGFL7 double-
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