牛β-酪蛋白座位无启动子基因打靶载体的构建.pdfVIP

● C T - 7·24 ●BRICULTURAE华北农学报·2010，25(4)：1 BO雎●U—S删朋 牛6·酪蛋白座位无启动子基因打靶载体的构建 李瑞国1，苗朝华2，侯 健3，关 宏3，安晓荣3，陈永福3 (1．中国生物技术发展中心，北京100036；2．中国农业科学院生物技术研究所，北京100081； 3．中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京100094) 590 833 因和报告基因的结构装入左右分别为牛p—casein基因lbp和5 bp的同源臂结构中，构建成无启动子基因打 靶载体pT-1590一LoxP-GFP．LoxP-5833。 关键词：牛13酪蛋白；LoxP；无启动子；打靶载体；构建 中图分类号：Q785 文献标识码：A 文章编号：l000—7091(2010)04一0017一08 Non-PromotorGene VectorConstructionforBovine Site Targeting p-casein LI Chao．hua2，HOU Rui—gu01，MIAO Jian3，GUANHon93，ANXiao—ron93，CHENYong—fu3 NationalCenterfor (1．China Biotechnology Development，Beijing Research of 10008 Institute，ChineseAcademyAgricultureSciences，Beijing1，China；3．StateKey Labfor Agro-Biotechnology，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing100094，China) vector neoand modified．Psv40forneowas Abstract：Plasmid pEGFP-C1，including G胛gene，was promoter introduceaLoxPlocusintoeachflankof and deleted，and non-promoter／／,eocompleteGFP，constructedpEGFP- LoxP．Thenweintroduced1590 and5833 frombovine intovector bp bpsequences genomes tedconstructionof is vector，which non—promotergenetargeting bovine口一casein locus． gene words：Bovine Key B—casein；LoxP；Non-promoter；Targetingvector；Construction 多年来，转基因动物作为研究基因功能与调控 打靶载体的设计要求也更高。可供选择的载体设计 的工具和生产相关药用蛋白的手段受到了很大的重 方式有很多，其中无启动子策略的富集效率最高也 视…。虽然科学家已经用显微注射法将DNA载体 最可靠(富集效率可比一般方法增加100倍左 注射入受精卵的原核获得了表达外源基因的转基因 右)¨·。这主要是因