03第三章 消毒与灭菌.ppt

第三章 消毒与灭菌 ;几个基本概念 1、杀菌作用——指某些物质或因素所具有的在一定 条件下，杀死微生物的作用。 2、抑制作用——指某些物质或因素所具有的抑制微 生物生长与繁殖的作用。 3、抗菌作用——指某些药物所具有的抑制或杀灭微 生物的作用。 4、灭菌——指杀灭物体中所有病原微生物、非病原微生物及芽胞、霉菌孢子的方法。 ;5、消毒——指杀灭物体中的病原微生物的方法。 6、防腐——指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。 7、无菌——指没有活的微生物的存在。 无菌法——采取防止或杜绝任何微生物进入动 物机体或其他物体的方法，称为无 菌法。 无菌技术——以无菌法进行的操作称为无菌技 术或无菌操作。;§3-1 物理因素对微生物的影响 ;（二）低温：大多数微生物对低温的抵抗力很强，当微生物处于最低生长温度以下时，其代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力，所以，常用低温保存菌种。 菌种保存方法： 1、低温保存法：常在5—10℃下保存细菌。 2、冷冻保存法：此时，温度必须迅速降低，起用时也应迅速融化。防止胞浆水分形成冰晶，破坏胞浆胶体、胞浆膜和细胞壁。反复冷冻与融化对微生物具有很大伤害，应尽力避免。 为了减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内加入10％左右甘油、蔗糖、脱脂乳或5％二甲基亚砜作为保护剂。 3、冷冻真空干燥法：是保存菌毒种、疫苗、补体、血清等的良好方法，可保存微生物及生物制剂数月至数年不失活。其原理是迅速冷冻，不形成冰晶，同时抽真空让固体冰中的水分子升华除去，封闭瓶口保存。;（二）高温 ： 高温对微生物具有明显的致死作用，是有效的灭菌方法。 高温灭菌原理：高温使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，DNA解连、断裂，导致细菌死亡。;1、干热灭菌法： 机理：干热可使蛋白质变性和因电解质浓缩而引起毒性作用。包括火焰灭菌和热空气灭菌两种。 1）火焰灭菌法：以火焰直接烧灼杀死物体中的全部微生物的方法，分为灼烧和焚烧两种。 灼烧—指直接在火焰上烧灼，主要用于耐烧物品，如接种针（环）、金属器具、试管口等的灭菌。 焚烧—指直接点燃或在焚烧炉内焚烧，常用于需烧毁的物品， 如传染病畜禽及实验感染动物的尸体、病畜禽垫料以其他污染的废弃物灭菌。 ;2）热空气灭菌法：利用干热灭菌器以干热空气进行灭菌的方法。 适用范围：高温下不损坏、不变质的物品，如各种玻璃器皿、瓷器、金属器械等的灭菌。 注意事项： a. 在干热情况下，由于热空气的穿透力较低，因此，干热灭菌需在160℃维持1-2h，才能达到杀死所有微生物及其芽胞、孢子的目的。 b.灭菌时，要使温度逐渐升降，切忌太快。; 2、湿热灭菌法： 机理：湿热可引起蛋白质变性与凝固而失去活性。 1）煮沸灭菌：煮沸10—20min可杀死所有细菌的繁殖体，若在水中加入1%碳酸钠或2—5%石炭酸，灭菌效果更好。 适用范围：用于外科手术器械、注射器、针头以及食具等。;2）巴氏消毒法：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不至严重损害其营养成分和风味的消毒方法。 适用范围：目前主要用于葡萄酒、啤酒及牛乳等食品的消毒。 分类： 第一类：低温维持巴氏消毒法，在63-65℃保持30min。 第二类：高温瞬时巴氏消毒法，在71-72℃保持15s。 第三类：超高温巴氏消毒法，在132℃ 保持1-2s。 加热消毒后需迅速冷却至10 ℃以下，称为冷击。 ;3）流通蒸汽灭菌法 ：利用蒸汽在蒸笼或流通蒸汽灭菌器内进行灭菌的方法，也称间歇灭菌法。灭菌后需保温过夜再灭菌，以达到完全灭菌的目的。 适用范围：常用于一些不耐高温的培养基的灭菌。;4）高压蒸汽灭菌法： 指用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法。是应用最广泛的、最有效的灭菌方法。 灭菌条件：通常用 1.02kg/cm2(15磅)的压力，在121℃温度下维 持15-20min，就可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物，达到完全灭菌的目的，但糖、牛奶培养基，10磅10分钟即可。 注意事项： a. 一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。 b. 灭菌物品不要互相挤压，以保证蒸汽通畅，使所有物品的温度均匀上升 。 适