09+谷氨酸.pptVIP

发酵产品工艺学;第五章 谷氨酸及味精;学习要点;第一节 谷氨酸生产菌种及其产酸机制;一、谷氨酸合成途径 P97;谷氨酸发酵的代谢途径;优先合成 谷氨酸比天冬氨酸优先合成，谷氨酸合成过量后，就会抑制和阻遏自身的合成途径，使代谢转向合成天冬氨酸 柠檬酸合成酶的调节 柠檬酸合成酶是三羧酸循环的关键酶，除受能荷调节外，还受谷氨酸的反馈阻遏和顺乌头酸的反馈抑制，谷氨酸合成过量时，代谢转向天冬氨酸的合成。;α-酮戊二酸脱氢酶的调节 在谷氨酸产生菌中，α-酮戊二酸脱氢酶活性微弱，使α-酮戊二酸不能继续氧化。 谷氨酸脱氢酶的调节 谷氨酸对谷氨酸脱氢酶存在着反馈抑制和反馈阻遏 α-酮戊二酸合成后由于α-酮戊二酸脱氢酶活性微弱，谷氨酸脱氢酶的活力很强，故优先合成谷氨酸;控制谷氨酸合成的重要措施;二、细胞膜通透性的调节 ;细胞膜是在细胞壁与???胞质之间的一层柔软而富有弹性的半渗透性膜，磷脂双分子层为其基本结构，在双分子层中镶嵌蛋白质。 ;一种是通过控制脂肪酸和甘油的合成，实现对磷脂合成的控制，使得细胞不能形成完整的细胞膜； 一种是通过干扰细菌细胞壁的形成，使得细胞不能形成完整的细胞壁，丧失了对细胞膜的保护作用。在膜内外渗透压差等因素影响下，细胞膜物理性损伤，增大膜的通透性。;1．控制细胞膜的形成 ;②利用生物素过量的糖蜜原料进行谷氨酸发酵时，添加表面活性剂或饱和脂肪酸。 在生物素过量的条件下，添加表面活性剂或饱和脂肪酸仍能进行谷氨酸发酵，其原因在于这些物质对生物素起拮抗作用，抑制不饱和脂肪酸的合成，导致油酸合成量减少，磷脂合成不足，使得细胞膜不完整，提高了细胞膜对谷氨酸的通透性。常用的表面活性剂有吐温-60、吐温-40等。常用的饱和脂肪酸有十七烷酸、硬脂酸等。;③利用油酸缺陷型菌株进行谷氨酸发酵，限制发酵培养基油酸的浓度。 油酸缺陷型菌株丧失了自身合成油酸的能力，直接影响磷脂的合成，不能形成完整细胞膜，必须添加油酸才能生长，所以通过控制油酸的添加量，实现细胞膜对谷氨酸的通透性。 当油酸过量时，该菌株只长菌或产酸少；当油酸亚适量时，随着油酸的耗尽，细胞膜结构与功能发生变化，使得谷氨酸的通透性提高。;甘油缺陷型菌株不能自身合成α-–磷酸甘油和磷脂，外界供给甘油才能使其生长，因此可以通过控制甘油添加量来控制细胞膜对谷氨酸的通透性。 当甘油添加量过多时，磷脂正常合成，菌体正常生长，不产酸或产酸低； 当甘油添加量过少时，菌体生长不好，产酸低，所以控制甘油亚适量是控制的关键。;⑤利用温度敏感突变株控制细胞膜的生物合成; 2．控制细胞壁的形成;青霉素是糖肽末端结构(D-Ala-D-Ala)的类似物，与转肽酶的活性中心结合，使转肽酶受到了不可逆的抑制，糖肽合成不能完成，结果形成不完整的细胞壁，使细胞膜处于无保护状态，易于破损，增大谷氨酸的通透性。 ;由葡萄糖生物合成谷氨酸的理想途径：A？B？;三、葡萄糖发酵谷氨酸的理想途径;; 若CO2固定反应完全不起作用，丙酮酸在丙酮酸脱氢酶的催化作用下，脱氢脱酸全部氧化成乙酰CoA，通过乙醛酸循环供给四碳二羧酸，则反应如下： 1mol 葡萄糖→2乙酰CoA →四碳二羧酸 0.5 mol 葡萄糖→乙酰CoA 由于3葡萄糖可以生成2mol的谷氨酸，因此理论糖酸转化率仅为54.4%。实际糖酸转化率处于54.4%和81.7%之间。 ;乙醛酸循环;异柠檬酸 琥珀酸 乙醛酸;葡萄糖发酵谷氨酸的理想途径;四、谷氨酸生产菌的种类和特征;谷氨酸生产菌的特征; 培养前期，bio充足，存在乙醛酸循环，中间物质和能量充足，长细胞，膜磷脂合成正常，正常反馈调节，不积累Glu，细胞形态正常。;第二节 培养基配制与生产菌种的扩大培养; 一、发酵培养基成分 P104;2、氮源：氮源是合成菌体蛋白质、核酸及谷氨酸的原料。碳氮比对谷氨酸发酵有很大影响。大约85%的氮源被用于合成谷氨酸，另外15%用于合成菌体。 谷氨酸发酵需要的氮源比一般发酵工业多得多，一般发酵工业碳氮比为100：0.2~2.0，谷氨酸发酵的碳氮比为100：20~30。 ;有机氮丰富有利于长菌，谷氨酸发酵培养基配制时通常添加一定量的有机氮，有利于菌体快速生长，而在发酵过程中流加尿素、氨水或液氨不但可以提供无机氮源，而且起着调节pH的作用。 液氨无需灭菌，流加时容易控制pH值，为大部分工厂所采用。;3、无机盐：是微生物维持生命活动不可缺少的物质。 主要功能：构成细胞的组成成分；作为酶的组成成分；激活或抑制酶的活力；调节培养基的渗透压；调节培养基的pH；调节培养基的氧化还原电位。起着调