12、UV-Vis、4-5.ppt

（2）作此波长区化合物的吸收光谱，与同浓度的纯物质的吸收光谱比较 纯物质 有杂质 A λ 3、化合物有较强吸收，而杂质在此波长区比化合物有更强吸收 方法： 测量化合物在此波长处吸收系数或吸收光谱，与纯物质比较 吸光系数增大 或吸收曲线变形 有杂质 （二）杂质的限量检测 1、化合物无吸收，而杂质有吸收： 规定化合物在该波长的吸收值不能大于某一数值。 例：肾上腺素 310nm 无吸收 肾上腺酮 310nm 有吸收 规定：肾上腺酮含量0.06% 则肾上腺素（2mg/mlHCl溶液) * 第四节 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计光路图主要部件 光源 单色器 吸收池 检测器 讯号处理 及显示器 仪器 可见分光光度计 仪器 紫外-可见分光光度计 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 将光源产生的复合光色散成单色光 入射狭缝 2 单色器 准直透镜 色散元件 聚焦透镜 出口狭缝 色散元件: 棱镜，现通用光栅 ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光:棱镜或光栅 β d 350 450 300 500 700 900 三级 二级 一级 167 233 300 150 250 β 蓝 红 棱镜 紫 光栅 红 蓝 紫 棱镜色散与光栅色散 3 吸收池 常比色皿 普通玻璃 石英玻璃 紫外区测量必须石英比色皿，普通玻璃有大吸收 1cm最常见 4. 检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。 光电池 硅光电池 硒光电池 200~625nm 紫敏光电管 625~1000nm 红敏光电管 光电管 光电倍增管 光学多道检测器：光二极管阵列(PDA) 紫外、可见光区 可见光区 光电管检测示意图 1、照射光 2、阳极 3、光敏阴极 4、90V直流 电源 5、高电阻 6、直流放大器 7、指示器 光电倍增管示意图 4 检测器 阵列型 PDA 光电二极管阵列PDA示意图 可记录全波长光谱 如Agilent8453, 1024个 同时记录190-1100nm 5、讯号处理与显示器 将讯号放大并显示结果。包括运算过程。 显示器： 电表 数字显示 荧光屏 打印结果 曲线扫描等 二、分光光度计的光学性能与类型 1、光学性能：7501紫外-可见分光光度计 波长范围：200nm~900nm 波长准确度： 波长重现（复）性：0.5nm 透光率测量范围：0~150% 吸光度测量范围：-0.17~2.00 光度准确度： 0.5%(T) 光度重复性： 0.5%(T) 分辨率：0.1nm 杂散光：0.5%(220nm,340nm,NaI(1%g/ml)) 2、分光光度计的类型 （1）.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光率，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 单光束分光光度计光路示意图 1、氘灯 2、钨灯 3，5、平面反射镜 4、聚光镜 6、进口狭缝 7、滤光系统 8，9球面反射镜 10光栅 11出口狭缝 12柱面透镜 13吸收池 14光电倍增管 （2）.双光束 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 1，2同步斩光器（旋转扇面镜） 3单色器出光狭缝 5，6，7，8、凹面镜 9、平面镜 10，11、参比与样品吸收池 12、光电倍增管 单波长双光束分光光度计示意图 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 （三）分光光度计的校正 1、波长的校正 短波长区校正：苯蒸气吸收光谱或苯 乙醇光谱 中波长区校正：氢灯或氘灯发射谱线 常用486.13nm（F线）656.28nm （C线） 长波长区校正：镨钕玻璃的吸收光谱 镨钕玻璃滤光片的吸收光谱 λnm 529 nm 1、定性鉴别方法： 对比法： （1）对比吸