慢病毒介导的RNA干扰对大鼠神经元PKCγ mRNA及蛋白表达的影响.pdfVIP

430 ·疼痛诊疗与研究 艮病毒介导的RNA干扰对大鼠神经元 mRNA及蛋白表达的影响 PKC7 邹望远 郭曲练 宋宗斌 刘畅 潘韫丹 【摘要】 目的探讨慢病毒介导的RNA干扰(RNm)对大鼠神经元PKCymRNA及蛋白表达的影 响。方法孕16d的sD大鼠，原代培养大鼠胚胎皮层神经元，随机分为3组，每组6孔，对照组(c 组)：不行任何处理；阴性对照组(NC组)：每孔加入阴性对照慢病毒3×105个；RNAi组：每孔中加入编 8hRNA)颗粒3×10个。5d后采用RT-PCR和Westernblot法 码PKCTshRNA的慢病毒载体(LV-PKCT 检测PKC7mRNA和蛋白的表达水平，并计算干扰效率。结果与C组比较，RNAi组大鼠神经元 PKC7mRNA及其蛋白表达水平均降低(P0．05)，NC组上述指标差异无统计学意义(P0．05)。基 因干扰效率99．3％，蛋白干扰效率85．2％。结论慢病毒介导的RNAi可有效地下调大鼠原代神经 元PKC7基因及其蛋白的表达。 【关键词】RNA干扰；蛋白激酶C；慢病毒属；神经元 on of mRNA in Effectoflentivirus-mediatedRNAinterference PKCy and ratneurolM expression protein ZOU Wang-yuan，GUOQu-lian，SONGZong-bin，LIUChang，PANYun-dan．DepartmentofAnesthesiology， South 410008，China XiangyaHospital，CentralUmversity，Changsha author：GUO Corresponding Qu-lian。Email：quZ洒,guo@yahoo．corn．c竹 To theeffectoflentivirus-mediatedRNA the 【Abstract】Objective interference(RNAi)on investigate of mRNAand inratneurons．MethodsculturedcorticalnelllDnsfromSDrBt PKC7 Primary expression protein of were dividedinto3 with6wellsineach (16 groups group dayspregnency)embryosrandomly group：control RNAi Creceivednotreatment．Eachwellin NC NC)and group (groupC)，negativegroup(group group．Group in RNAi Wflg lentivirns3x1旷．Eachwell Wag therecombinantlentiviralvector givennegative group given shRNA)．TheofPKCTmRNAand inratneuronswag containingPKC7shRNA(LV—PKC7 expression protein detectedRT-PCR