慢病毒介导的siRNA靶向干扰EIF4G1鼻咽癌稳定细胞株的建立.pdfVIP

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2018-04-07 发布于北京
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慢病毒介导的siRNA靶向干扰EIF4G1鼻咽癌稳定细胞株的建立.pdf

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Med ·844· 南方医科大学学报(JSouthUniv) 2009；29(5) 慢病毒介导的siRNA靶向干扰EIF4G1鼻咽癌稳定细胞株的建立涂露霞，方唯意，刘真，李欣，何英，谢思明，姚开泰(南方医科大学肿瘤研究所／教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室，广东广州510515) 摘要：目的检测人真核翻译起始因子4GI(EIF4G1)基因在8株鼻咽癌细胞中的差异表达，寻找最高表达的细胞株。构应用荧光定量PCR检测EIF4Gl 达水平。构建重组靶向EIF4G1 产生的成熟慢病毒颗粒感染5．8F细胞。经杀稻瘟菌素筛选后，建立稳定表达siRNA的5—8F鼻咽癌细胞株。最后荧光定和未干扰组相比可明显抑制EIF4Gl 5-8F鼻咽癌细胞株。慢病毒重组质粒．建立了稳定靶向干扰EIF4GI表达的siRNA 关键词：真核翻泽起始因子4Gl；慢病毒；莺组质粒；RNA干扰；鼻咽癌细胞中图分类号：R365文献标识码：A 文章编号：1673-4254(2009)05-0844—04 Establishmentofastable carcinomacelllinewith RNA nasopharyngeal for interferenceEIF4GI genesilencing ． TU Kai-tai Lu-xia，FANG Zhen，LIXin，HE Si-ming，YAO Wei-yi，LIU Ying，XIE for andProteomicsofHuman Diseases ofEducation CancerResearch Lab Ministry Institute，KeyTranseriptomics Major Supportedby and Medical Province，SouthernUniversity,Guangzhou510515，China Guangdong Toestablisha carcinoma linewithstableEIF4GI induced Abstract：ObjectivenasopharyngealmPC)cell genesilencingby mRNAin8NPC RNAGiRNA)．MethodsTheEⅢ4Gl levels celllines 5-8F，6一lOB，C666-l，CNEl， smallinterfering including SUNElweredetectedfluorescence recombinant CNE2，HNEl，HoNEl，andby quantitativeRT-PCR(QRT—PCR)．The lentivirusshRNA EIF4Glwas intomaturelenfivirus293FTcellsandusedto expressionplasmidtargetinggene packaged by iIlfect5-8Fcells．AtierblasticidinselectionofNPCcells