慢病毒介导的RNA干扰对小鼠胰腺星状细胞中半乳糖凝集素-1基因沉默效应的研究.pdfVIP

外科理论与实践2011年第16卷第5期 ·455· ·论著． 慢病毒介导的RNA干扰对小鼠胰腺星状细胞中 半乳糖凝集素．1基因沉默效应的研究 袁中旭， 汤 东， 陆子鹏， 卫积书， 张静静， 蒋奎荣， 苗 毅 (南京医科大学第一附属医院胰腺外科江苏省临床医学研究院肿瘤生物研究所，江苏南京210029) f摘要1目的：评价慢病毒介导的RNA干扰技术对小鼠胰腺星状细胞(mPSC)中半乳糖凝集索．1缸如cti，1．，)基因 的沉默效应。并观察其对mPsC增殖的影响。方法：设计并合成3条础c￡i加，基因特异性RNAi靶序列，构建到慢病 mPsC中卫Ⅱ如cIi，1．J基因的表达。构建的RNAi慢病毒载体感染mPsC后刎ec￡i，I．JmRNA表达量同对照组比较，分别 卫n如c￡i，1．，RNAi慢病毒载体能显著降低mPsC中galectin．1的表达量．膨如ct讥．，沉默后mPSC增殖能力下降。 关键词：胰腺星状细胞；半乳糖凝集素．1；慢病毒； RNA干扰 中图分类号：R657．5文献识别码：A 文章编号：1007舶lO(2011)05．0455舶 on ofIen廿vin睁mediatedI州A III stellakce№ StIIdysnenci赡enht intemren∞仰辨l∞6n-lIIIi∞呻nc心a廿c KⅡi—ro％肘MD¨Dep州，，lem矿 y叭Ⅳ踟，l舭l‘，烈ⅣGDD晦LU五．pe％彤肼如帆删A／vG肋酊i唱肌，vC n御i，lceAc础my旷ai眦以 砌lc陀越幻sⅡ学佛I船尼您t例妇dⅣ∞p删矿№面嘞胁d记以№西em咄肋懈u 2，DD29傩i，地 JI拈d记i聊加￡如船旷死瑚r四面如gy，肌呵饥g．，Z彻伊l‘ To e如ctoftheconstmctedmice 【Abst隋ct】objecⅡve g如cfin一，RNAinte如陀nce(RNAi) explo陀tllesilencing lentivim8vectoron 8teUateceIlsofmice ofRNAi p蚰c陀atic (mPSC)．Memods，11Ir∞e雎ctive弛quence8targeting 0f wem DNAthe and confi邢ed．Botll∞n跎明d蚰ti眈n鸵Oligo we陀desi印ed，syntllesi舱d g砒c‘fn—J targeting舱quence cl∞edintotIIePLKO．1一PUR0vector．触erco—t讯nsfectionoftIIe7r293 lentivimswere w船 ceUs，tIle produced．mPsC iIIf毫ctedwiththelentivimsand8creened and