稳定干扰鸟苷酸环化酶C基因表达的人胃腺癌细胞株的筛选和建立.pdfVIP

稳定干扰鸟苷酸环化酶C基因表达的人胃腺癌细胞株的筛选和建立.pdf

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胃肠病学2011年第16卷第7期 ·429· .短篇论著· 稳定干扰鸟苷酸环化酶C基因表达的人胃腺癌细胞株的筛选和建立术 张健锋i4印红军1张弘2朱惠君3毛振彪1A 消化病实验室2病理科3 南通大学附属医院消化内科1【226000) 背景:正常胃黏膜组织不表达肠上皮细胞特异性受体鸟苷酸环化酶C(GC-C),但肠化生、异型增生和胃腺癌组织存 在GC-C异位表达。目的:筛选并建立GC—C特异性短发夹RNA(shRNA)稳定转染的胃腺癌细胞株。方法:构建靶向GC. GC-C mRNA和蛋白表达。G418筛选阳性克隆并建立GC-C h后的GC-C 果:GC—CshRNA可抑制SGC-7901细胞株的GC.C基因表达.以GC.Csh3的抑制效果最佳.转染48 mRNA和蛋白沉默率分别为77.o%和62.2%。有效筛选并建立了GC-CshRNA稳定转染的SGC.7901细胞株。Gc七 mRNA沉默率为65.3%。结论:成功建立了GC.CshRNA稳定转染的SGC-7901细胞株。为下一步研究奠定了基础。 关键词 鸟苷酸环化酶;RNA干扰;胃肿瘤 andEstablishmentofHumanGastricAdenocarcinomaCenLinewithStableInterferenceof Screening Guanylyl CGene ZHANG 0 Cyclase ExpressionJianfeng,YINHon百un,ZHANGHong,ZHUHu玎un,MAZhenbiao.Department ofGastroenterology,AffiliatedHospitalofNantongUnweary,Nantong,Jia咿uProvince(226000) to:MAO Zhenbiao,Email:mzb63@163.corn Correspondence intestinal isnot innormal of cell Background:GuanylylcyclaseC(GC-C).aspecificreceptor epithelial expressed is inintestinal and adenocareinomatissue.Aims:To gastricmucosa,butectopically gastric expressed metaplasia,dysplasia screenandestablishthe adenocarcinomacelllinewithstableinterferenceofGC-C short RNA gastric geneby hairpin vector GC-Cw如constructedandtransfectedinto adenocarcinoma

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