稳定转染CDK2干扰RNA真核表达载体的人脑胶质细胞瘤SHG44细胞系的建立.pdfVIP

稳定转染CDK2干扰RNA真核表达载体的人脑胶质细胞瘤SHG44细胞系的建立.pdf

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·469· 稳定转染CDK2干扰RNA真核表达载体的 人脑胶质细胞瘤SHG44细胞系的建立 呼格吉乐1, 苏仁娜2, 高乃康3 (1.内蒙古医学院附属医院检验科,内蒙古呼和浩特010050;2.内蒙古自治区第三医院康复中心; 3.内蒙古医学院附属医院) 摘要:目的:构建CDK2的干扰RNA真核表达载体,并且稳定转染人脑胶质细胞瘤SHG44细胞来抑制 CDK2的表达,为人脑胶质细胞瘤的研究提供有价值的资料。方法:1.根据siRNA设计原则和GeneBank数据库 CDK2的干扰RNA真核表达栽体,G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染干扰RNA真核表达栽体的 SHG44细胞系,用倒置荧光显微镜观察荧光蛋白表达量。结果:1.成功构建了CDK2干扰RNA真核表达载体。 经鉴定证实,构建的siRNAs序列与基因库中序列完全相同,并且未发现有突变、缺失、插入等异常存在。2.获得 定转染CDK2干扰RNA的SHG44细胞系。 关键词:干扰RNA;CDK2:胶质细胞瘤 中图分类号:R730.264 文献标识码:A 文章编号:1004—2113(2011)06—0469—04 ESTABLISHMENToFASHG44CELLLINESTABLY BY TRANSFECTEDCDK2一SIRNACONSTRUCT Hugejile,SURen—na,GAONai—kang Medical 010050 (AffiliatedHospital,InnerMongolia College,HohhotChina) thefunctionof stable ofCDK2SiRNAastro— Abstract:Objective:Toexplore CDK2,a expression celllinewas vector established.Method:卧e P‰”“一1一∞K2.CKD2 cytoma Eukaryoticexpression spe. cificRNA basedonthe Wasse. interference.Wasconstructed fromGenbank.The sequence plasmid andtransfectedtoSHG44cellline transfectantswereselected stable quenced usingoligofectamine.The oftheconstructWasconfirmed stabletransfectantshad G418.Results:The by sequence fight.All sig- nificantlower ofCDK2 withthecontrol P‰8i1—1一cDK2一 expressioncompared clones.Conclusion:711le transfectants SHG44stable were establishedwit

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