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稳定转染CDK2干扰RNA真核表达载体的
人脑胶质细胞瘤SHG44细胞系的建立
呼格吉乐1, 苏仁娜2, 高乃康3
(1.内蒙古医学院附属医院检验科,内蒙古呼和浩特010050;2.内蒙古自治区第三医院康复中心;
3.内蒙古医学院附属医院)
摘要:目的:构建CDK2的干扰RNA真核表达载体,并且稳定转染人脑胶质细胞瘤SHG44细胞来抑制
CDK2的表达,为人脑胶质细胞瘤的研究提供有价值的资料。方法:1.根据siRNA设计原则和GeneBank数据库
CDK2的干扰RNA真核表达栽体,G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染干扰RNA真核表达栽体的
SHG44细胞系,用倒置荧光显微镜观察荧光蛋白表达量。结果:1.成功构建了CDK2干扰RNA真核表达载体。
经鉴定证实,构建的siRNAs序列与基因库中序列完全相同,并且未发现有突变、缺失、插入等异常存在。2.获得
定转染CDK2干扰RNA的SHG44细胞系。
关键词:干扰RNA;CDK2:胶质细胞瘤
中图分类号:R730.264 文献标识码:A 文章编号:1004—2113(2011)06—0469—04
ESTABLISHMENToFASHG44CELLLINESTABLY
BY
TRANSFECTEDCDK2一SIRNACONSTRUCT
Hugejile,SURen—na,GAONai—kang
Medical 010050
(AffiliatedHospital,InnerMongolia College,HohhotChina)
thefunctionof stable ofCDK2SiRNAastro—
Abstract:Objective:Toexplore CDK2,a expression
celllinewas vector
established.Method:卧e P‰”“一1一∞K2.CKD2
cytoma Eukaryoticexpression spe.
cificRNA basedonthe Wasse.
interference.Wasconstructed fromGenbank.The
sequence plasmid
andtransfectedtoSHG44cellline transfectantswereselected
stable
quenced usingoligofectamine.The
oftheconstructWasconfirmed stabletransfectantshad
G418.Results:The
by sequence fight.All sig-
nificantlower ofCDK2 withthecontrol P‰8i1—1一cDK2一
expressioncompared clones.Conclusion:711le
transfectants
SHG44stable were establishedwit
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