免疫检测中的学习讨论PPT.ppt

* * 免疫检测过程中的学习讨论 实验工作中的一些学习讨论 一：Elisa实验注意事项 1 试剂：从冰箱拿出后不应立即使用，因为Ag,Ab反应最适是37度。 2 加样：加样枪加样位置不能太高 以免引起污染。 3 孵育：时间要够 两步法最好不用一步法 板条最好不要擂起放。 4 洗板：影响最大 充的水量要够 5 比色 6质控 所有的步骤都应按SOP要求做 TP Trust 测非特异性抗体 Tppa 测特异性抗体 对于临床医生，必须给Trust Tppa 同时的结果。 定量和定性结果检测不一致很正常 要填方法。 HIV初筛实验室管理及职业暴露 行业标准： 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》 技术规范：《全国艾滋病检测技术规范》 样品的保存 样品的保存 用于抗原抗体检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2--8度，一周以上应存放于-20度以下。 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品因及时送确诊实验室，筛查阴性的样品可根据具体需要决定保存时间。建议至少保存1-2个月。 样品的运送 筛查试剂 筛查程序：初筛试验和复检试验 筛查试验结果的报告 筛查试验呈阳性反应样品的转送 每一次试验必须使用室内质控品 污染物处理 按照实验室生物安全通用要求和消毒技术规范处置废弃物 艾滋病检测实验室常用的消毒方法: 物理消毒方法 高压蒸汽消毒121摄氏度保持15-20分钟 干燥空气烘箱消毒140摄氏度保持2-3小时 化学消毒方法 含氯消毒剂（次氯酸钠含有效氯2000-5000mg/l） 75%乙醇 2%戊二醛 艾滋病检测实验室物品常用消毒方法 废弃物缸5000mg/l次氯酸钠 生物安全柜工作台面和仪器表面75%乙醇 溢出物5000mg/l次氯酸钠 污染的台面和器具2000mg/l次氯酸钠，也可以用过氧化氢或过氧乙酸，器械可用2%戊二醛消毒 什么是职业暴露 职业暴露是指由于职业关系而暴露在危险因素中从而有可能损害健康或危及生命的一种情况 医务人员职业暴露是指医务人员在从事诊疗、护理活动过程中接触有毒有害物质或传染病病原体从而损伤健康或危及生命的一类职业暴露 职业暴露分类 感染性（80-90%为针刺伤暴露） 放射性 化学性 HIV职业暴露及预防 意外被艾滋病病毒感染或被HIV的血液、体液污染了皮肤或黏膜 被含有艾滋病病毒的血液 、体液、污染了的针头及其他锐器刺破皮肤；其他 职业暴露方式 皮肤针刺伤或锐器切割伤 黏膜或破损皮肤（如皲裂或皮肤炎症等）接触感染性材料 皮肤虽然完整无破损但大面积或长时间（几分钟或更长）接触感染性材料 可能暴露于HIV的意外情况 与艾滋病的血液 精液 阴道分泌物 组织器官等接触即可发生感医务人员在医疗 护理过程的针刺 切割伤等 性侵犯 被艾滋病咬伤、针扎伤等 增加感染危险性的暴露因素 接触体液量大 所损失伤口深 造成伤口的器械上有明显的血迹 器械曾插入静脉或动脉内（采血的针头） 体液离开身体时间越短，危险性越大 接触的患者在事故后60天内死于AIDS HIV培养物、黏膜感染可能性大于皮肤 病人处于窗口期 安全处置锐利器具 不要把用过的器具传递给别人 在进行侵袭性操作时，一定要保证足够的光线，尽可能减少创口出血 千万不要向用过的一次性注射器针头上盖针头套 等等 所以 当接触这些危险品时需戴手套 当有破损皮肤要带双层手套 脱去手套后立即洗手 进行手消毒 处理 处理原则 及时处理原则 报告原则 保密原则 知情同意原则 处理 局部处理 评估和确定 预防性用药 随访和咨询 登记和报告 紧急局部处理 清洗 尽量挤出损伤处的血液 用肥皂水和流动水清洗 用生理盐水冲洗黏膜 消毒 冲洗后用消毒液如75%酒精‘0.2-0.5%过氧乙酸’0.5%碘伏等 评估和确定 艾滋病病毒职业暴露分三级 根据病毒载量水平分轻 重度和暴露源不明三种 一旦决定用药 越快越好 CDC推出时间 1小时以内效果好 4小时 效果降低 最迟不超过24小时 即使超过 也应该预防性用药 一级暴露： 暴露源：体液 血液或含有体液 血液的医疗器械、物品 类型：暴露源沾染了有损伤的皮肤或者黏膜，暴露量小且暴露时间较短。 二级暴露： 暴露源：体液 血液或含有体液 血液的医疗器械、物品 类型：A暴露源沾染了有损伤的皮肤或者黏膜，暴露量大且暴露时间较长。 B暴露源刺伤或者割伤皮肤，但损伤程度较轻，为表皮擦伤或者针刺伤 三级暴露 暴露源：体液 血液或含有体液 血液的医疗器械、物品 类型：暴露源刺伤或者割伤皮肤，但损伤程度较重，为深部伤口或割伤物有明显的血液 随访和咨询 在暴露后第4、8、12周、6个月即使检测 对服用的药物进行监控和处理 观察和记录