水稻不育系培矮64S的空间诱变效应及后代的SSR分析研究.pdfVIP

航天育种高层论坛论文选编 29 水稻不育系培矮64S的空间诱变效应及后代的SSR分析 王丰1李永辉1，2柳武革1金素娟1，2李金华1 刘振荣1 廖亦龙1 黄德娟1 黄慧君1 朱满山1 (1．广东省农业科学院水稻研究所，广东广州510640；2江西农业大学，江西南昌330045) 摘要：对经过卫星搭载的培矮64S种子及后代进行了有关性状研究和SSR标记分析，结果表明：培矮 64S空间诱变后代SPl代，发芽率、存苗率、株高、抽穗期、株叶型的性状与对照没有明显变化；但 SP2代在育性、株高、粒型、育性等性状上发生了变异；从SP3代中获得柱头比培矮64S明显增大的变 平均为28．9r7％，变异座位在水稻基因组中是随机分布的。 关键词：水稻培矮64S空间诱变SSR分析 空间诱变主要是利用返回式卫星将农作物种子带上高空，在空间微重力、强辐射、高真空和 地磁场等特殊综合因素的作用下，引起后代产生形态、生理生化、产量、育l生等特征特性的遗传 变异，经过定向选择可以从中选育出优良品种(品系)、具有特异性状的育种材料以及核不育 系¨。J。它具有诱发变异频率高、幅度大、多数性状能遗传、稳定快、育种周期短、可以获得罕 见变异类型等特点，近年来已发展成为一种诱变育种新途径旧1。 培矮64S是目前生产上大面积应用的光温敏核不育系。以其为母本配制成功并大面积推广的 两系杂交稻组合已有10余个，其中培杂双七连续5年成为广东省年种植面积最大的水稻品种(组 合)，也是第—个广东丝苗型优质两系杂交稻组合；两优培九更是被誉为超级杂交稻的先锋组合。 由于培矮64S的柱头较小，制种产量往往较低，在一定程度上限制了制种成本的降低。为此，本 研究希望通过对培矮64S的航天诱变，研究空间诱变效应，筛选大柱头、高异交结实特性的优良 变异株系，并对部分变异后代进行SSR标记分析，从分子水平上研究空间诱变的机理，为航天诱 变育种提供进一步的理论依据。 1材料与方法 1．1材料 SP3后代中选育的10个不同类型的突变体(表1)。 30 航天育种高层论坛论文选编 1．2处理方法 取不育系培矮64S种子搭载第18颗返回式卫星进行太空诱变处理，保留一部分种子作地面对照。 10一一lO。Pa，辐射强度为180—186毫伦，微重力为10一一10～g。 1．3田间试验 航天搭载处理的种子当代(SPl)和相应的留地对照种子于2004年春在海南无落田谷混杂的 菜地中种植繁种，同时考查发芽率和出苗率。成活单株移栽至前作为蔬菜的大田，观察株高、抽 穗期、株叶型等农艺性状，成熟后进行套袋收种，用作第2代(SP2)调查分析。 2004年晚季在前作为蔬菜的大田中种植SP2代，同期间隔种植留地的对照种子。从SP2代分离群 体中筛选出育性、粒型、株高、生育期等变异单株。 2005年早季在广东省农科院水稻所基地种植培矮64S的SP3代。按株行种植，抽穗扬花期观 察可育株的柱头情况，从中选出优良不育株系，并取10个突变单株和对照培矮64S的叶片用作 SSR分析。 1．4 SSR分析 序列，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，实验初步选了64对引物。PCR扩增和电泳 分析具体参照Panaud等M1的方法稍加修改。 1．5 SSR标记带型记录方法 参照杨存义等Ⅲ修改完善，A表示与对照相比扩增片段数增多；B表示与对照相比扩增片段 数减少；C表示与对照相比片段分子量增加；D表示与对照相比片段分子量减少；对照带型记为 航天育种高层论坛论文选编 3l 1。 2结果与分析 2．1 SPl代的田间表现 比对照有所下降，但无明显差异；同时，SPl代株高、抽穗期、株叶型态、结实率均与对照无明 显差异；说明空间诱变多为隐陛陛状，当代不表现。 2．2 SP2代植株的突变类型 培矮64S在SP2代发生明显的变异，主要变异性状是抽穗期、株形、株高、粒型和育性等。 株，单株变异频率为9．7％。 从表2中可以看出，所考查的11个可育变异单株中，由不育变为可育的单株自交结实率高达 的65．9厘米显著提高23．1厘米，谷粒长、粒宽和长宽比(粒型)等性状也均有较大变化。1、3 在千粒重方面，除7号单株的千