微透析-液相色谱-化学发光联用微透析技术应用于中药药动学的研究(张群林)PPT.ppt

微透析技术 (microdialysis, MD) 时间分辨性、空间分辨性 不破坏机体完整性 提供游离态小分子化合物 样品可不经预处理直接用于测定 样品量少、浓度低 微透析 多个器官连续取样 与高灵敏度分析技术联用 活体内待测组分的实时、连续、检测 微透析采样技术 微透析–液相色谱–化学发光法测定大鼠 血和脑组织中丹参酚类化合物浓度 及其药动学研究 脂溶性成分 二萜醌类 水溶性成分酚类 丹参素DSS、原儿茶酸PA、 原儿茶醛PAL、咖啡酸CA 丹酚酸 A、丹酚酸B等 丹参 近期药理研究发现：丹参酚类化合物具有改善血液循环、减少脑梗死面积、抑制肾素血管紧张素系统、和清除自由基、保护损伤的脑组织等药理作用。 研究背景 研究背景 丹参水溶性成分的药动学研究 吸收和分布： 丹参提取物给家兔灌服，采用液-液萃取技术对家兔血浆中的丹参素进行萃取，用胶束毛细管电泳进行测定。灌胃后30 min，肝、肺、肾、脑组织中的丹参素浓度最高；70 min时，心组织中丹参素浓度最高；50 min时，脾组织中DSS浓度最高。灌胃给药后，DSS在很短的时间内进行吸收、分布。其中肝组织中的丹参素浓度最大，表明DSS在新西兰大白兔体内的代谢主要在肝组织中进行。 杨燕, 杨荣, 卫引茂, 等. 药物分析杂志. 2008, 28(3): 362. 研究背景 代谢和排泄 Zhang等利用HPLC-UV和HPLC-MS对大鼠灌胃200 mg · kg-1丹参总酚酸（丹参素 2.3%，原儿茶醛4.6%，丹酚酸B 60.7%）后尿液和粪便中的代谢产物进行了研究，在收集的24 h尿液中检测到5个代谢产物：丹参素、咖啡酸、阿魏酸、异阿魏酸和3,4-二甲氧基苯乙酸，而在粪便中未检测到代谢产物。 Shen等利用LC/TOFMS，对大鼠静脉注射纯化的丹酚酸A后血浆中的代谢产物进行了研究，发现了5个代谢产物：单葡萄糖醛酸化丹酚酸A、甲基葡萄糖醛酸化丹酚酸A、甲基丹酚酸A，二甲基丹酚酸A和二甲基葡萄糖醛酸化丹酚酸A。 Zhang J, He Y, Cui M, et al. Biomedical Chromatography. 2005, 19(1): 51. Shen Y, Wang X, Xu L, et al. Rapid Communications in Mass Spectrometry. 2009, 23(12): 1810. 研究背景 药动学参数及生物利用度 Guo等用LC-MS测定了大鼠注射冠心宁冻干粉后血浆中DSS，PA，PAL，绿原酸，CA和SalB的浓度。获得了这几种酚类化合物的t1/2，Cmax，Tmax。 潘坚扬等考察了丹参素在大鼠体内药动学和口服生物利用度。用超高压液相色谱三重四级杆质谱联用法测定丹参素血药浓度，计算药动学参数，丹参素的口服生物利用度为9.53%，口服生物利用度较差。 Han等用LC-MS测定了大鼠静脉注射剂量为10、20和40 mg · kg-1 的纯度为98 %的SalB后的血药浓度，求算了AUC，MRT，t1/2，V等参数，发现AUC随剂量增加，各剂量组之间MRT，t1/2和V无差异。 Guo XR, Chen XH, Li L, et al. Journal of Chromatography B. 2008, 873(1): 51. 潘坚扬, 赵筱萍, 邵青. 中国中药杂志. 2008, 33(2): 146. Han DE, Gao ZD, Zhao D, et al. Biomedical Chromatography. 2009, 23(10): 1073. 研究背景 脑部药动学研究 罗世英等对大鼠灌胃丹参水提物（DSS 32.4 , PAL 6.0, SalB 36.2 mg · kg-1）采用液-液萃取法对血清样品和脑组织匀浆样品进行预处理，用HPLC-UV法测定，在大鼠血清中检测到DSS、PAL和SalB，在脑组织匀浆中未检测到这三种物质。但由于紫外检测器灵敏度较低，脑匀浆中未检测到的原因有待进一步试验证明？ 郑晓晖等在研究复方丹参方中使药冰片对君药丹参药动学和组织分布的影响时，用丹参水煎液对新西兰大白兔灌胃给药（10g · kg-1），通过从小脑延髓池抽取脑脊液，以及脑组织匀浆采用LC-MS，在脑脊液和脑组织匀浆中测得DSS，但未报道丹参素在脑组织中的药动学参数。 罗世英, 钟志国, 林坚涛, 等. 中药药理与临床. 2009, 25(4): 44. 郑晓晖, 赵欣, 房敏峰, 等. 西安交通大学学报 (医学版). 2007, 2