大鼠髁突软骨细胞发育中相关信号通路的初步筛查 (1).pdfVIP

口腔颌面外科杂志 2014年 12月 第 24卷 第 6期 Journ~ofOralandMaxillofacialSurgeryVo1．24No．6December，2014 ·405· ． 基础研 究 ． 大鼠髁突软骨细胞发育中相关信号通路的初步筛查 李 宁 ， 江莉婷 ， 谢银银 2， 魏立37 高益鸣 (1．上海交通大学医学 院附属瑞金 医院 口腔科 ，2．上海血液学研 究所 ，医学基 因组学 国家重点实验室 上海 200025；3．上海市伤骨科研究所 ，上海 200025) 摘【要】目的：通过建立的大鼠髁突软骨细胞发育过程中蛋 白表达差异谱，分析可能参与的信号通路 ，为进一步认识髁 突软骨生理性及病理性生长改建的信号调控机制提供相关信息。方法 ：收获出生后 1、7、l4、28d共 4组 SD大 鼠髁 突软骨细胞 ，甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定软骨细胞 。提取各组软骨细胞总蛋 白．采用 iTRAO标记定量 蛋 白，2Dnano．HPLC和基质辅助激光解吸／电离 串联飞行时间质谱 (MALDI—TOF．TOF)．获取出生后大 鼠髁突软骨细 胞发育过程 中差异蛋 白的表达谱 ，所得数据用 MASCOT软件处理 ．筛选样本之间有意义的差异蛋 白．运用 GO法及 David软件进行 KEGG信号通路分析 。结果：共鉴定 137种具有可信度表达 的蛋 白．有44种蛋 白参与至少 27条 KEGG信号通路 ，其 中ECM．受体相互作用 、焦点粘连、actin骨架调节 、Ca2+信号通路、血管平滑肌收缩、GnRH信号通 路、肌醇三磷酸代谢 、磷脂酰肌醇信号系统以及核糖体等信号通路具有统计学意义 。结论 ：在大 鼠髁突软骨发育中， 各信号通路蛋 白在时间、空间上差异性表达 ．共同形成复杂的信号传递 网络 。 关【键词】 髁突； 软骨细胞； 蛋 白质组学； 信号通路； iTRAQ； 鼠 【中图分类号】R782．2；Q343．6 文『献标志码1A [文章编号】1005．4979(2014)06—0405．08 doi：10．3969~．issn．1005—4979．2014．06．002 StudyofRelated-signalPathwaysRegulateChondrocyteM aturationand Differentiationin theM andibularCondyleoftheRat LINL，JIANGLi—ting~，XIEYin-yin2,WEILis,GA0Yi—ming (1．DepartmentofStomatology,2．StateKeyLaboratoryofMedicalGenomics，ShanghaiInstituteof Hematology,RuijinHospital，SchoolofMedicine，ShanghaiJiaotongUniversity,Shnaghai200025； 3．ShanghaiInstituteofTraumatologyandOrthopaedics，Shanghai200025,China) A【bstract]Objective：Toanalyzerelated—signalpathwaysregulatingproliferationanddifferentiationofratmandibular condylarehondrocytes．M ethods：The 1·，7-，14一，and28一day—oldSD ratscondylarchondrocyteswereharvestedinvitro， identifiedbytoluidineblues