高转化率高活力液体糖化酶研究.pdfVIP

高转化率高活力液体糖化酶 中国食品科技学会酶制剂专业学会 侯炳炎 高转化率高活力液体糖化酶是指基本不含葡萄糖转苷酶，严格控制残留的微 生物数量，酶活力≥100000 u／m1的一种糖化酶产品。本文论述了：(1)．葡萄糖转 苷酶对葡萄糖收率的影响，去除转苷酶的方法；(2)．严格控制产品中微生物数量及 其措施；(3)．提供高酶活力产品的积极意义。 糖化酶是一种俗称，正式名称为a-1，4葡聚糖葡萄糖水解酶(1，4—0一D glucan 非还原末端依次水解0—1，4糖苷键，生成葡萄糖。亦能水解麦芽糖和支键淀粉分 支点的Q—l，6键，但水解速度甚慢。 我国糖化酶1979年投入工业化生产，至今已有20多年生产时间，该产品不 仅发展成酶制剂行业中最大的品种，而且有较大数量出口(2004年全国该产品出 口超过l万吨，酶活力按100000 u／m1计)。产品质量由最初的只能采用盐析法制 成粗制糖化酶，提高到可以生产高转化率高活力液体糖化酶。进入新世纪，开始 出口国外。 高转化率高活力液体糖化酶是指基本不含葡萄糖转苷酶，严格控制残留的微 生物数量，酶活力≥100000u／m1的一种糖化酶产品。采用该产品生产葡萄糖，DE 值可达97％～98％，葡萄糖可达95％。 本文重点论述高转化率高活力液体糖化酶。 1．产品中基本不含葡萄糖转苷酶 截止目前，国内外酶制剂生产企业，均以黑曲霉(Aspniger)液体深层发酵 生产糖化酶。酶的贮存稳定性好，并能在较高的温度和较低的PH值下水解已经液 化的淀粉，受到应用厂家的欢迎。但是，在发酵生产过程中，会产生一定量的葡 萄糖转苷酶。据文献报导，采用黑曲霉发酵，糖化酶活力100GAU，可同时产生葡 萄糖转苷酶loo一12000TG。 葡萄糖转苷酶能切开麦芽糖分子结构中的a-1，6键，并将游离出的一个葡萄 糖残基转移到另一个葡萄糖分子或麦芽糖分子中的Q-1，6位，生成非发酵的异麦 芽糖、异麦芽三糖、潘糖等低聚糖。如果糖化酶中的转苷酶含量高，生成不能发 酵的低聚糖就多，使淀粉转化成葡萄糖的收率明显降低，糖化酶中转苷酶浓度与 葡萄糖产率降低关系如表1．所示。 表1． 转苷酶浓度(TG单位／公斤淀粉) 葡萄糖产率降低(％) 50 0．2 100 0．5 150 O．8 200 1．2 250 1．6 h 反应条件： 4．2，60C，48 265GAU／kg淀粉ds，32％dsb，PH 120 因此，是否含有葡萄糖转苷酶是衡量液体糖化酶产品质量的一项极为重要的 指标。欲使其实现该产品的高转化率，除去糖化酶发酵液中的转苷酶是非常必要 的。 (1)．采用膨润土吸附发酵液中的转苷酶将其分离出去，这一方法已为生产厂家普遍 TG／100GAU。 使用，取得良好效果。采用该方法，产品的转苷酶含量小于10 因此，国产高转化率高活力糖化酶已基本无转苷酶活力。 (2)．建立葡萄糖转苷酶活力的检测方法。建议生产企业参考Sherry等发明的转苷 方法。 2．严格控制产品中的微生物数量 产品