细胞工程 第6章 胚胎工程2.pptVIP

3 单精注射(显微受精) 又称第二代试管婴儿，显微受精技术是体外受精与显微操作技术相结合的一项胚胎工程技术，使得由透明带和卵质膜所形成的生理受精障碍得以排除。 将近一半的不孕夫妇的不孕原因是由于男性因素造成的，如少精症或无精症 ICSI: Intra cytoplasmic sperm injection 卵母细胞胞浆内单精子显微注射（ICSI）又称“第二代试管婴儿”，是在体外受精-胚胎移植基础上发展起来的显微受精技术，通过直接将精子注射入卵母细胞胞浆内，来达到助孕目的，在治疗男性不育症上有着十分美好的前景。 ICSI ICSI的特点 正常受精率高，多精受精率低 精子浓度、形态对受精无影响 类似:着床前基因诊断 (第三代) 是从4-8细胞期胚胎中吸取1-2个卵裂球进行染色体和/或基因诊断，选择染色体和/或基因正常的胚胎移植回子宫腔。主要适用于遗传性疾病的种植前诊断，如果女方年龄较大（超过35岁）应进行筛查，选择染色体正常的胚胎移植。 fluorescence in-situ hybridization (FISH) Preimplantation Genetic Diagnosis (PGD) 第三代与第二代相近，只是要对卵裂球进行“胚胎种植前的遗传学诊断”，挑选出无遗传性疾病基因的胚胎移植入母体子宫，它适用于患有某种遗传性疾病的夫妻。 例如有一位母亲是血友病基因的携带者，她自己虽然不发病，但是，她的两个儿子都是血友病患者，接连不幸夭折。这位悲伤的母亲来到试管婴儿中心，要求给她做试管婴儿。 医生考虑到她的情况，决定给她做“第三代”试管婴儿。 随后就是取卵、人工授精等等步骤。当受精卵分裂到4-8个细胞时，取出其中的一个细胞进行诊断：对于胚卵是XY型，将来能发育为男子的就淘汰了；而胚卵是XX型（即将来发育为女儿）的则进行移植。 试验成功了，一个健康的女婴来到人间。按照遗传学法则，这个女婴虽然和她妈一样，也是血友病基因的携带者，但不会发病，将是一个“健康”的女孩。 可见，“第三代”试管婴儿是优生的保证。它把妇科的产前诊断，提前到胚胎尚未着床时，这对于患有遗传病或有遗传疾病倾向的妇女、高龄孕妇是很有必要的。 PGD技术的难点 胚胎细胞活检 单细胞诊断技术 试管婴儿技术视频 4 种质资源的低温冷冻保存 精子冷冻 卵母细胞冷冻 胚胎冷冻 睾丸、卵巢组织冷冻 生殖干细胞冷冻 哺乳动物胚胎冷冻保存的研究进展 英国生物学家Polge （1949）意外发现的甘油在精子低温冷冻中有很好的保护作用，拉开了低温生物学新的一幕。 人类生殖助孕、家畜繁殖和生物多样性保护 23年后，Whittingham(1972)用慢速冷冻方法首次成功地把8-细胞的小鼠胚胎在-196°C冷冻保存，而且由冻胚获得了后代。 Rall 和 Fahy（1985） 首次使用一种无冰晶的超快速的冷冻方法—玻璃化冷冻法，成功冷冻了小鼠胚胎。 How are embryos frozen? a controlled rate freezer 精液冷冻 1950年英国科学家Polge和Smith采用卵黄和甘油作保护剂，用干冰作冷源进行精液的冷冻，解冻后授精成功，开创了世界人工授精的新世代。 如今，发达国家的全部奶牛和绝大多数肉牛采用冻精输精。精液冷冻保存成为最可靠的保存方法。 器官冷冻?? 器官冷冻保存??? 大鼠卵巢冷冻保存已经获得成功 Nature杂志报告了大鼠卵巢在－196℃液氮中冷冻保存，冻融后再移植的卵巢恢复了排卵和内分泌功能，并成功受孕。 睾丸组织冷冻已经获得成功 器官冷冻仍处于实验研究阶段 人体器官如果能冷冻保存，移植手术就从容多了 人体冷冻更不现实 冷冻保存 迈克尔·杰克逊曾将自己的精子存放于世界各地的精子银行里 英国科学家用冷冻２１年的精子育出健康男婴 长期冷冻的精子仍具有很强的活力，这将为那些接受长期癌症治疗、但又担心会丧失生育能力的年轻人带来希望。 25年前，这名男孩的父亲当时只有17岁，但不幸患上睾丸癌。治疗医生告诉他，癌症治疗的结果很可能会导致他不能生育。于是建议他，取出自己的一些精子进行冷冻保存，如果他治疗后真的不能生育，可以让他的妻子接受人工授精。于是，这名年轻男子取出了自己的一些精子，分装在放有液氮的5个小瓶子里，5个小瓶子被冷冻在医院的冰柜里。 ??? ?到1992年，这个已经30岁的男子痊愈出院。但他已经在治疗过程中失去了生育能力。这名男子的妻子立即想起了丈夫在治疗前存放在医院的5瓶精子。但是，也许是老天在开玩笑。这对夫妇努力了3年，解冻了其中4瓶精子，丈夫的精子还是不能跟妻子的卵子结合。 2000，他们鼓足勇气，在医生的帮助下，将最后1瓶精子放入了