蛋白质工程的崛起05-22.pptVIP

基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 这些蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 例如： 干扰素是由动物体内的效应T细胞产生的一种糖蛋白，几乎能抵抗所有病毒引起的感染。同时，在治疗癌症方面也有十分可观的疗效。但是，干扰素在体外保存相当困难。 玉米中赖氨酸的含量比较低。 在已研究过的几千种酶中，只有极少数可以应用于工业生产，绝大多数酶都不能应用于工业生产，这些酶虽然在自然状态下有活性，但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在，反应温度较高，在这种条件下，大多数酶会很快变性失活。 干扰素的体外保存困难 玉米中赖氨酸的含量较低 工业生产中蛋白质类酶的稳定性低 蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。 三、蛋白质工程的进展和前景 1、前景诱人：如用此技术制成的 ，具有 、耗电少和 的特点。 2、难度很大：主要是目前科学家对大多数蛋白质的 的了解还很不够。 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 .蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同？ 答：基因工程是遵循中心法则，DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能，基本上是生产出自然界已有的蛋白质。 蛋白质工程是按照以下思路进行的： 确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列，可以创造自然界不存在的蛋白质 * 1.4 思考：如果想让某一个生物的性状在另外一个生物的身上表达，常用的方法有哪些？ 1、在种内可以用什么方法？ 杂交育种 2、在种间可以用什么方法？ 基因工程育种 一、蛋白质工程崛起的缘由 基因工程的实质： 将一种生物的???? ????? 转移到另一种生物体内，后者产生它本不能产的??????? ，进而表现出? ? 。 基因 蛋白质 新的性状 基因工程的局限性： 如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，在-70oC的条件下，可以保存半年。 赖氨酸的合成机理： 天冬氨酸激酶 二氢吡啶二羧酸合成酶 前体物质 赖氨酸 负反馈调节 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶 （104位的天冬酰胺） 改造 天冬氨酸激酶 （异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶 （异亮氨酸） 目前科学家尝试通过对蛋白质结构的改造，来延长酶的半衰期，提高酶的热稳定性，延长药用蛋白的保存期，抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失等，取得了一定的进展。 这些在科学研究和工业生产中亟待解决的难题均无法通过基因工程来完成。人们开始着眼于对现有蛋白质的改造，以及制造目前从天然蛋白质中找不到的蛋白质。就这样，蛋白质工程应运而生，并迅速崛起。 二、蛋白质工程的基本原理 1、目标： 根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。 怎么操作呢？ 逆转录 转录 DNA RNA 翻译 肽链 复制 复制 折叠等 具有空间结构的蛋白质 表达生物特有的功能或性状 天然蛋白质的合成过程 遵循中心法则，并需经过高级空间结构的转变 2、蛋白质工程的原理：基因改造 3、基本途径： 从预期的蛋白质功能出发 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因） 讨论： 某多肽链的一段氨基酸序列是： ……-丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸-…… 丙氨酸：GCU、GCC、GCA、GCG 色氨酸：UGG 赖氨酸：AAA、AAG 甲硫氨酸：AUG 苯丙氨酸：UUU、UUC （1）怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。 （2） 确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）？ 可以通过人工合成的方法获取或基因的定点诱变技术来改变。 前提： 了解蛋白质的结构和功能 原理： 改造基因（基因修饰或基因合成） 目的： 定向改造或制造蛋白质 蛋白质工程与基因工程的比较： 联系 结果 方法过程 蛋白质工程 基因工程 项目 通过对基因的改造来实现对它所编码的蛋白质的定向改造 基因的剪切、拼接导入、表达 创造自然界原本没有的、具优良特性蛋白质 所获得的蛋白质是自然界已存在的 操作对象都是基因