粮食中麦角甾醇含量的检测研究.pdfVIP

—— 生里塑迪堂垒塑三昼兰查堡垒堡茎垄塑—— 粮食中麦角甾醇含量的检测 冯永建 何学超丁建武 1 国家粮食储备局成都粮食储藏科学研究所，成都61003 0前言 粮食、食品、饲料受真菌侵染的程度的定量分析通常采用微生物技术如平板计数法及侵染率 (种子表面受到真菌侵染的百分比)。这些方法很费时，重现性差，而侵染率又难以找到平均样品。 平板计数法最大的缺陷在于可以反映能生长的霉菌孢子的数量，而无法评价无孢子形成的菌丝体 的数量。 为避免这些缺陷，人们建立化学分析方法；这些方法从霉菌菌丝体的化学组成人手，如几丁质含 量分析和麦角掰醇含量分析。 几丁质是N一乙酰基一D一葡萄糖胺的聚合物，是真菌细胞壁的组成成分，广泛存在于真菌茵丝体 和真菌孢子之中，也存在于昆虫外骨骼之中。几丁质可通过酸、碱或酶水解后用比色法分析，分析方 法的缺陷在于检测灵敏度低，重现性差并不能排除杂质干扰。 麦角甾醇是真菌细胞膜的组成成分，对真菌细胞膜和其他细胞成分的形成起着重要的作用。 麦角甾醇也可以被某些细菌合成，但相对于真菌来说，数量甚微。植物甾醇主要为B一谷甾醇、豆 甾醇及维生素D2；某些禾木科植物低浓度的胆固醇；植物不能合成麦角甾醇或仅有痕量的麦角甾 醇形成。因此，麦角甾醇可以作为真菌的特有成分进行分析，其含量的多少反映粮食受真菌侵染 的程度，间接反映粮食的品质状况；又由于麦角甾醇检测灵敏度高，检测过程快捷，简单，结果准 确，麦角甾醇的含量多少还可以做为粮食食用安全的敏感指标之一，如麦角甾醇的含量分析可用 于粮食的就仓干燥，以评价就仓干燥的工艺是否安全合理。麦角甾醇的分析方法有比色法，气相 色谱法，红外光谱法，紫外光谱法，及液相色谱法。由于液相色谱法的快速，准确，重现性好而被各 国专家普遍采用；如澳大利亚的乔治教授采用固相萃取技术及液相色谱分离技术检测麦角甾醇 的含量，以控制就仓干燥的工艺。考虑到我国的国情，要将麦角箔醇的检测技术在我国推广应用， 必须具备检测成本最低，检测快速，结果准确，方法通用性强的特点；因此，我们参照AOAC的麦 角甾醇的检测技术及其他资料介绍的甾族化合物检测技术的优点，经比较研究之后，形成了一种 快速，简单，准确，通用的麦角甾醇的检测方法。 1 实验部分 1．1仪器 测器，C—R6A记录仪 作者简介：冯永建，男，生于1970．3．12，副研究员，四川省成都市花牌坊街95号 ．．261．． 堡壅雯—些—————————————————————一 1．1．2进样针251xL及501．LL(瑞士Hamilton公司) 1．1．3 色谱柱Spherisorb硅胶柱250×4．0mm，5卜(Waters公司) 钻石C18柱150×4．6mm，5斗(迪马公司) 1．1．4旋风磨40目筛片 1．1．5水浴 1．1．6滤膜0．45斗 1．1．7 实验室常规仪器 略 1，2试剂 1．2．1正己烷HPLC级 1．2．2异丙醇HPLC级 1．2．3 乙氰HPLC级 1．2．4正相流动相正己烷／异丙醇=99／1 1．2．5反相流动相乙氰／异丙醇／水=90／60／21 201_LL上机分析； 1．2．7其他分析纯试荆略 1．3样品前处理 在氮气的保护下取出三角瓶，塞上瓶塞，于冰水中快速冷却，在氮气的保护下加饱和NaCl溶液 据标准品的峰高用外标法定量。 1．4结果计算 检测结果按下式计算： X(pg／g)=CxVxVI／V／G C：标准溶液浓度，Ixg／mL； V：体积，mL； V。：标准溶液进样量，仙L； V：：样品溶液进样量，“L； G：样品质量，g。 1．5色谱分析条件 色谱柱Spherisorb硅胶柱250x4．0mm，5斗(Waters公司)； 流动相正己烷／异丙醇=99／1，2．0mL／min； 检测波长282nm，0．1000AUFS； 记录仪