浅谈直接抗球蛋白试验.docVIP

精品论文 参考文献 浅谈直接抗球蛋白试验 李晖 (黑龙江省鸡西市疾病预防控制中心　　158100) 【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）13-0129-02 直接抗球蛋白试验是用抗球蛋白试剂直接和待检红细胞进行的反应，目的是检测红细胞上是否存在免疫球蛋白，该试验是免疫血液学最常用的试验之一。 1 直抗阳性的意义 无论“多抗”、“抗IgG”还是“抗C3”阳性，均可称为“直抗阳性”。直抗阳性可以是在体外造成的，也可以是在体内就形成的。直抗阳性的红细胞在体外偶尔会发生溶血，在体内则多半会受到免疫系统的攻击而溶血破坏，其具体意义需要结合具体情况加以判断。 1.1 直抗阳性的意义 多抗作为一种广谱的抗球蛋白试剂，在直抗试验中常常作为初步筛选试剂使用。由于“多抗”中主要包含了“抗IgG”和“抗C3”，因此一旦多抗出现阳性结果，通常需要用单抗IgG和单抗C3进一步分析。 1.2 单抗IgG阳性的意义 单抗IgG阳性，说明红细胞表面致敏了IgG免疫球蛋白。要明确这一结果的意义，除了需要了解患者具体情况外，进一步分析致敏在红细胞上的IgG抗体的性质也很重要。因此在单抗IgG试验阳性后，需要进一步分析这些致敏在红细胞上的IgG抗体的特性。 (1)自身抗体(抗体特异性不明)：如果从患者红细胞上放散下来的IgG抗体与谱细胞反应，同时患者不是新生儿，在4个月内无输血史，则该抗体可以确认为自身抗体，患者很可能患有自身免疫性疾病。大多数自身抗体与一组谱红细胞反应，会出现较为一致的反应强度，难以确认抗体的特异性。 (2)类同种特异性自身抗体：偶尔一些自身抗体在和谱细胞反应时，与某些细胞反应较强，与另一些反应较弱，对照谱细胞抗原列表(细胞谱)分析，可见该抗体似乎包含着某种类似同种抗体的特异性。用吸收放散试验可以证明，该抗体不是自身抗体和同种抗体的混合物，它仍然是一种自身抗体，只是该自身抗体有着某些类似同种抗体的特点。例如：某放散液与一组谱细胞均反应，但与E阳性的细胞反应更强，与E阴性的细胞反应较弱，似乎在放散液中存在同种抗－E抗体。但用不含E抗原的红细胞吸收放散后，得到的放散液与谱细胞反应，结果显示仍然具有和原来的放散液相同的反应格局，由此可以确定该自身抗体中含有类似抗－E的抗体特异性，这种抗体可称之为“类抗－E同种特异性自身抗体”。 2 阳性直抗试验的评价 2.1 血液标本采集 要证实阳性DAT不是体外补体致敏的结果，应获取EDTA抗凝剂抗凝的标本。这种抗凝的标本可用于DAT，并提供放散技术所需要的红细胞来源。 同时需要一管新鲜收集的凝固的血液标本做血清研究之用。若怀疑冷抗体引起的DAT阳性，其血标本凝固应保持在37℃，直到血清被分离出来为止。 2.2 初步的血清学研究 若决定评估阳性DAT时，有三方面的调查对测定红细胞在体内被抗体附着的原因有所帮助： (1)用抗IgG及抗C3d做试验，可测定附着在红细胞上的免疫球蛋白的类型。 (2)血清抗体筛选与鉴定：这种研究应在室温和(或)37％进行，并用未处理或酶处理的O型试剂红细胞做间接抗球蛋白试验(IAT)。 (3)用抗体附着的红细胞放散液做试验，以确认附着抗体的特异性。 2.3 进一步的研究 (1)当血清内没有未知抗体存在，在放散液内只有自身抗体存在，且患者最近未曾输过血，不需要进一步做血清学试验。 (2)若在血清内与放散液中或两者有同种抗体发现时，则需进一步研究证实其特异性。 (3)若血清与放散液两者在所有试验阶段均无反应，而已知患者接受过高剂量静脉用青霉素，则应考虑用青霉素附着的红细胞做试验。若患者曾输过ABO不相合的血液成分，可用A型或B型红细胞做试验，以确定是否因被动获得的抗－A或抗－B而造成的阳性DAT。 3 抗球蛋白试验的影响因素 3.1 红细胞的洗涤 直抗试验对待检红细胞的洗涤有很高的要求，通常要求红细胞至少要用生理盐水洗涤3次。其目的是去除血浆或血清，如果血浆或血清未洗涤干净，则其中含有的球蛋白可以中和抗球蛋白试剂，导致试验的假阴性。 3.2 结果观察 抗球蛋白试验的结果受到观察结果的方式影响。抗球蛋白试验形成的红细胞凝集，其强度远不如抗－A、抗－B所造成的红细胞凝集。如果振摇试管的力过大可将松散红细胞凝块打碎，使强阳性结果误判为弱阳性结果，弱阳性结