原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
独一味颗粒的微生物限度检查法的研究
精品论文 参考文献
独一味颗粒的微生物限度检查法的研究
崔岩
（辽宁省朝阳市药品检验检测所 辽宁 朝阳 122000）
【摘要】 建立独一味颗粒的微生物限度方法。按《中国药典》2010年版微生物限度检查法进行验证和试验。经方法学验证试验得出的检查方法可用于独一味颗粒的微生物限度检查。
【关键词】 独一味颗粒；微生物限度检查；方法学验证
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）21-0353-02
The Validation of Microbiological Test for DuYiWei keli
CuiYan (Drug Control Institute of Chaoyang City in Liaoning Province, 122000
【Abatrct】 The method of microbial limit test for DuYiWei keli was established.According to the method of microbial limit on Edition,2010 of Chinese Pharmacopoeia.The validation test results showed that the method could be used for microbial limit test for DuYiWei keli
【Key words】 DuYiWei keli;Microbial limit test;Validation test
中药口服制剂容易受到微生物的污染，因此微生物限度检查是《中国药典》2010年版一部中药丸剂必检项目，是微生物污染状况控制的重要指标。当建立的微生物限度检查法时，应进行方法学验证，以确定所采用的方法是否适合该产品，使检验结果更具有有效性。因此本文通过对辽宁朝阳龙城制药厂提供的独一味颗粒不同批次进行了微生物限度检查法的验证，从而确定了该品种的微生物限度检查法。
1.仪器与材料
1.1仪器 生物安全柜（BHC-1300ⅡA2），生化培养箱（SHP-150），隔水培养箱（JC303-3B ）。
1.2培养基和稀释液 营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、改良马丁培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4-甲基伞形酮葡糖苷酸培养基（MUG）。稀释液：pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，按要求配制，灭菌。
1.3菌种 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC（B）44 102]、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC（B）26 003]、枯草芽孢杆菌（Baillus subtilis）[CMCC（B）63 501]、白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC（F）98 001]和黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC（F）98 003]均由中国药品生物制品检定所提供。
2.方法
2.1菌液制备菌液制备：接种大肠埃希菌、金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，30～35℃培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，23～28℃培养24～48小时。上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数50～100cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23～28℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml） 聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱。然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管中，用含0.05%（ml/ml） 聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50～100cfu的孢子悬液。
菌悬液制备后，若在室温下放置应在2h内使用，若保存在2～8℃的菌悬液可以在24小时内使用。黑曲霉菌的孢子悬液保存在2～8℃，可在存储期内替代对应量的新鲜孢子悬液使用。
2.2供试液制备：取10g,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml,振摇，制成1:10的供试液。取1:10的供试液1ml,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液9ml，即为1:100的供试夜；取1:100的供试液1ml,加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液9ml，即为1:1000的供试夜。
2.3细菌、霉菌和酵母菌计数的验证实验
2.3.1常规平皿法
供试液制备：依据《中国药典》2010年版一部附录“微生物限度检查法”中供试液制备法：取本品10g,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100
文档评论（0）