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遗传育种 2005~2006年全国养羊生产与学术研讨会议论文集 73
BMPR-IB在皮肤组织、皮脂腺、汗腺部分没有表达(见图1、2、
取BMPR-IB的质粒。转化后挑单菌落培养过夜,提取质粒。以
13和17作为引物,PCR扩增质粒中的目的片断。并纯化浓缩。3)。因此,可以证明BMPR-m基因对内蒙古绒山羊出生前后毛
取10止纯化样品进行体外转录。同时用地高辛标记探针,37℃囊的分化和增生有影响。
转录5小时。-70℃保存探针备用。 3讨论
1.2.3原位杂交载有组织的切片经常规脱蜡、复水、蛋白酶 factor
转化生长因子B(TGF,tran面ormlnggrowth bet8)超
K消化并冲洗后预杂交,每片滴加50%去离子甲酰胺预杂交液 家族由一大类具有共同结构特征的细胞因子组成,在物质代谢、
50
ILl,45℃,30分钟;同时进行探针变性,85℃10分钟,然后置细胞增殖、分化、粘附和凋亡以及生物各种组织器官生长发育中
于冰水中l-2mln;杂交,每片滴加50m杂交液(探针浓度达到
都发挥着极其重要的作用。目前,已有16种BMP被分离和克
O.5峭/m1),加2SSC的湿盒内,80℃变性10分钟,然后45℃杂隆,大多属于转化生长因子B超家族。过去有研究表明BMP2,
交过夜;结合抗体(1:500加入抗体稀释液)进行免疫检测,最
后。用NBT/BCIP显色,伊红复染,中性树脂封片,在显微镜下观细胞中均有表达。将编码表皮中BMPRlA基因进行c他—介导
察并照相。空白对照除不加探针外,其余步骤相同。 突变。结果导致牙齿发育受阻及少毛。突变体小鼠的毛干和毛
2结果 囊内根鞘不能分化,已知的毛囊分化调节因子,如Msxl。M8妇。
原位杂交阳性结果为电镜下见细胞核内有紫蓝色颗粒而背
中BMPRIA对牙齿发育和出生后毛囊的分化、增生的调控提供
景清晰。由放大图可以清晰的看到BMPR-IB基因在胚胎期和
成年羊初级毛囊、次级毛囊的内根鞘均有表达,毛干的髓质中也 了确凿的遗传学证据。
有零星表达,而在连接组织鞘和外根鞘未见有信号的表达。
图l BMPR-IB在115天毛囊中的表达圈2BMPR-IB在125天毛囊中的表达图3BMPR-IB在12个月毛囊中的表达
(注:图中箭头所指位置有信号表达。)
初步研究发现BMPR-IB基因是与绒毛生长有关的基因之究以内蒙古绒山羊为材料,初步研究发现BMPR-IB基因在胚胎
一,但其影响绒毛生长发育的机理尚未搞清楚,有待于进一步研 期和成年羊初级毛囊、次级毛囊的内根鞘均有表达,证明BM.
究。多项研究表明BMPR-IB基因是控制Booroola美利奴羊、多PR-IB基因对内蒙古绒山羊出生前后毛囊的分化和增生有影
浪羊、小尾寒羊等绵羊品种多胎性的主效基因,可以用于对绵羊 响。
产羔数的选择,而目前类似的研究在山羊中还比较罕见。本研
辽宁绒山羊卵泡中FSHR基因表达的研究
姜怀志,戢爽
(吉林农业大学动物科技学院,长春130118)
摘要:以B.Ac血作为内源性内标,采用RT-PCRYf增技术,.,研究辽宁绒山羊不同发育时期卵泡FSHRmRNA的表述丰度、
明,辽宁绒山羊争本地山羊相同发育阶段卵泡FSHR基因表达水平差异不显著(P0.05),随着卵泡发育,其表迭水平的
变化趋势也相一致;辽宁城山羊直径小于lmln卵泡和直径为3-4衄卵泡的颗粒细胞FSHR基因表达水平显著高于膜细
胞。
关键词:卵泡;FSH;基因
74 中国草食动物 2005年
哺乳动物的产仔率与卵巢的排卵率是密切相关的,而排卵 OIY26
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