大肠杆菌O157H7及其重要毒力基因eaeA基因研究.pdf

文献综述 DNA样本中检出荧光信号，最小检出量为23．7龟；线性范围达8个数量级；平行复管检测， 组内变异系数为0．84％0(n=20)，同一组样本(n=6)间隔30d重复检测，结果无显著性差异： 对试验感染鸭肝脏和脑组织中鸭瘟病毒的检出率为100％(40／40)，对临床病例的检测结果与 病毒分离鉴定结果一致；从核酸提取到报告检测结果仅需3h；该方法特异性强，对传染性 喉气管炎病毒、鸭病毒性肝炎病毒、鸡源大肠杆菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭副伤寒沙门氏 菌等非鸭瘟病毒DNA检测，不出现非特异性荧光信号。 二、实时荧光定量RT-PCR技术用于病毒性疾病诊断中存在的问题 虽然实时荧光定量RT-PCR技术在病毒性疾病诊断中有许多优点：操作简便、特异性强、 敏感度高、检测周期短、无致癌物质污染等等，但是使用实时荧光定量RT-PCR方法，仍然 存在不少问题需要完善，主要表现在怎样避免扩增基因组DNA、如何消除和评定由于样品 处理。仪器的差异和个人操作而带来的误差以及如何更准确定量基因。同时对实验条件要求 较高，检测费用高，不易普及等问题亟待及决。 三、实时荧光定量RT-PCR技术的展望 综上所述，实时荧光定量RT-PCR技术在病毒性疾病诊断中得到迅猛发展，使病毒性疾 病定量变得更容易、快速和敏感，通过条件优化可以使定量变得更准确和可靠，是一种理想 的定量检测病毒含量的新方法。实时荧光定量RT-PCR技术也可以在病原体检测、细菌性疾 病含量的测定、基因突变点的检测上发挥重要作用。对疾病的诊断和畜禽业的发展将起到重 要的作用。 参考文献略 大肠杆菌0157：H7及其重要毒力基因一eaeA基因 龚霞1郭霄峰2 (1．韶关学院英东生物工程学院，广东韶关5120052．华南农业大学兽医学院，广东广州510640) 新发现的病原微生物和重新抬头的病原微生物是当前世界医学界面临的一个新的课题， 肠出血性大肠杆菌0157：H7就是其中的一种。大肠杆菌0157：H7已被认定为70年代以来新 发现的28种传染病的病原体之一。 一、大肠杆菌0157：H7概述 肠出血性大肠杆菌(EHEC)0157：H7是一种重要的新发传染病病原菌。1975年，美国首 次从一例肠出血性结肠炎的患者中分离到大肠杆菌0157：H7。E．coli0157：H7引起的出血性 结肠炎是1982年在美国俄勒岗州和密执安州，因食用汉堡包引起的食物中毒的病人粪便中 被分离并命名的。 来的20多年中，由其引起的食源性疾病的暴发、流行在发达国家和一些发展中国家不断发 生，且呈逐年上升的趋势。据美国疾病控制中心(CDC)报告，每年全国约发现2万多例病人， 死亡人数200--一500人。目前，大肠杆菌0157：H7感染呈全球性流行，以日本为最甚。全球 已有六大洲30多个国家发现有该菌所致的感染暴发或流行，已经对人类健康构成了极大威 胁，已引起世界各国对015；：H7感染的关注。 我国自1986年在江苏徐州首次检出0157：H7肠血性大肠杆菌以来，陆续在福建、浙江、 安徽、广东、河北、宁夏等十多个省、市的食品、家畜(禽)和腹泻患者的粪便中分离出此病 原菌。据国家疾控中心和卫生部报道，我国江苏、安徽两省曾于1999年5月～8月局部暴 发流行大肠杆菌0157：H7感染性腹泻，患者超过2万例，死亡177例，流行时间7个月，其 重症之多、病死人数之多是前所未有的，2000年流行范围更广。从国内外EHEC 0157：H7的 ．116． 第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会2006年会议论文集 流行情况看，我们有必要对EHEC0157：H7给予足够的重视。 0157：H7是肠出血性大肠杆茵的主要血清型，’EHEC0157：H7感染可使人患腹泻、出血 性结肠炎(HC)，还可引发溶血性尿毒综合征(HUS)及血栓性血小板减少紫癜(TTP)等严重 并发症，严重者可导致死亡，致死率达5％～10％；对人体的健康造成很大的威胁，已引起 全世界广泛的重视。EHECO渤：H7的感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和 抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点。已经成为全球性的公共卫生问题，不论是发达国家 还是发展中国家，都受到广泛关注。 大量的流行病学调查研究显示，家畜家禽是Om：H7大肠杆菌的重要贮存宿主，巳发 现的家畜家禽包括牛、猪、羊、鹿、狗、猫、