生物化学-13.基因表达调节.ppt

基因如果存在就一定会表达吗？;基因表达调节 Regulation of Gene Expression ;本章要点;一、基因表达的概念;人类基因组DNA中约含3万(安全中数）个基因，但在某一特定时期，只有少数的基因处于转录激活状态，其余大多数基因则处于静息状态。一般来说，在大部分情况下，处于转录激活状态的基因仅占5%。这都是基因表达调节的结果。 通过基因表达以合成特异性蛋白质，从而赋予细胞以特定的生理功能或形态，以适应内外环境的改变。 ;二、基因表达调节的特点：时间性及空间性 ;三、基因表达的方式 ;看家基因是维持细胞最低限度功能所不可少的基因, 如编码组蛋白基因、编码核糖体蛋白基因、线粒体蛋白基因、糖酵解酶的基因等。 看家基因的特点：必需性、广泛性、持续性、稳定性;（二）诱导和阻遏表达： 诱导表达（induction）是指在特定环境因素刺激下，基因被激活，从而使基因的表达产物增加。这类基因称为可诱导基因。 阻遏表达（repression）是指在特定环境因素刺激下，基因被抑制，从而使基因的表达产物减少。这类基因称为可阻遏基因。 ;四、基因表达的生物学意义;大肠杆菌在培养基里只有乳糖时才表达乳糖分解代谢酶类，而有葡萄糖时则不表达这些酶类。这样一方面适应了环境的变化，同时也避免了浪费（同时保留两套利用糖的酶类）。;五、基因表达调节的基本原理 ;中心法则;（二）基因转录调节基本要素：;原核生物;是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列。;共有序列(consensus sequence) 决定启动序列的转录活性大小。;2? 操纵序列（操作子） ——阻遏蛋白(repressor)的结合位点;3) 其他调节序列、调节蛋白;真核生物;2．反式作用因子： 反式作用因子（trans-acting factor）又称为分子间作用因子，指一些与基因表达调节有关的蛋白质因子。 反式作用因子与顺式作用元件之间的共同作用，才能够达到对特定基因进行调节的目的。 比较：顺式作用元件——DNA序列 反式作用因子——蛋白质分子 ;2. DNA - 蛋白质、蛋白质-蛋白质的相互作用; 大多数调节蛋白在与DNA结合之前，需先通过蛋白质-蛋白质相互作用，形成二聚体或多聚体，然后再通过识别特定的顺式作用元件，而与DNA分子结合。这种结合通常是非共价键结合。 ;3. RNA聚合酶; 重点：原核生物基因转录调节 ;一、操纵子的结构与功能 ;** 操纵子=控制区+信息区 控制区： （1）启动子（Promoter）:为cAMP受体蛋白 （CRP）和RNA聚合酶结合区。 （2）操作子（0perater）:为调节蛋白结合位 点。 信息区:由一个或数个结构基因串联在一起组成。;乳糖操纵子的调节机理;;原核生物大肠杆菌乳糖操纵子(Lac operon) 的控制区包括启动子（其CRP结合位点位于RNA聚合酶结合位点上游）和操作子；其信息区由3个酶基因串联组成： 1、β-半乳糖苷酶基因（lacZ）； 2、通透酶基因（lacY）； 3、转乙酰基酶基因（lacA）。 调节基因（阻遏基因），产生调节蛋白（阻遏蛋白）。有些调节基因产物对操纵子起着正调节作用。;（一）乳糖操纵子(lac operon)的结构;;乳糖操纵子的结构基因及其表达产物;二、乳糖操纵子的调节机制;1、负调节：阻遏蛋白。该蛋白由调节基因（I）最先表达合成，与操纵子（O）结合阻止转录；与乳糖结合失活。 2、正调节：CAP（降解物基因活化蛋白）。乳糖操纵子的启动子是弱启动子，RNA聚合酶与其结合的能力很弱，只有活化的CAP(与cAMP结合）结合到启动子上游的CAP位点后，促使RNA聚合酶与启动子结合，才能开始有效转录。 3、协调调节：负调节和正调节协调作用。 ;阻遏蛋白的结构和作用机理;识别螺旋;操作子序列为一段含有28bp旋转对称的回文结构，阻遏蛋白亚基与其结合时正好贴在DNA的深沟处，识别螺旋的氨基酸与碱基对之间形成特异的氢键。 操作子序列在其上游和下游各有一个相似的回文结构，阻遏蛋白4个亚基除与操纵序列回文结构结合外，还与上游或下游的回文结构结合，中间DNA形成突环，由此增加了阻遏蛋白阻止转录的效果。;;;CAP与cAMP;葡萄糖分解代谢的降解物能抑制腺苷酸环化酶活性并活化磷酸二酯酶，降低cAMP浓度。;CAP与cAMP结合后活化，可结合到启动子上游的CAP位点上，促进RNA聚合酶与启动子结合。可诱导分解代谢操纵子的CAP结合位点均含有TGTGA序列。;;;（一）乳糖操纵子的诱导：;;（二）乳糖操纵子的阻遏：;;习题;趣闻：乳糖操纵子与诺贝尔