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生物必修2 6.2 基因工程及其应用-暖
利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 能发荧光的转基因鱼 三、转基因生物和转基因食品的安全性 转入萤火虫荧光酶基因的转基因烟草苗 转基因玫瑰 第二节 基因工程及其应用 第六章 从杂交育种到基因工程 一、基因工程的原理 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿直接定向地改变生物,培育出新品种。 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 1、基因工程的概念: 基因工程 基本工具: 基因“剪刀”——限制性核酸内切酶 基因“针线”——DNA连接酶 基因的运载体——质粒、噬菌体、动植物病毒 一、基因工程的原理 2、“基因剪刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶) C T T A A G A A T T C G 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。 例如:EcoRI限制酶,专一识别GAATTC序列,并在G和A之间将序列切开。 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 黏性末端 黏性末端 尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端 DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的黏性末端,碱基能够通过互补进行配对。 CTTCATG GAAGTACTTAA GGGATT AATTCCCTAA ACG TGCTTAA AATTCCCATT GGGTAA GGCATCTTAA AATTCCGTAG GGCATCTTAA AATTCCGTAG 一、基因工程的原理 3、“基因针线”——DNA连接酶 连接酶的作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 CTTCATG GAAGTACTTAA GGGATT AATTCCCTAA GGCATCTTAA AATTCCGTAG 连 接 酶 连接的部位: 生成磷酸二酯键(梯子的扶手) 思考:如何将重组DNA分子送入受体细胞呢? 5、基因工程的操作步骤: 从细菌中取出质粒 从细胞中取出DNA 用同种限制酶切断两个DNA 具有相同的黏性末端 提取目的基因(如人的胰岛素基因) 用连接酶将目的基因与质粒连接 (形成重组DNA分子) 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞(如大肠杆菌) 利用质粒中具有某些特性的基因进行检测并判断目的基因是否表达 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 目的基因的检测和鉴定 大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 基因工程 别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本工具 基本过程 结果 实质 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 提取 →拼接 →导入 →检测和鉴定 基因重组 限制酶、DNA连接酶、运载体 基因工程 的基本步骤 基因工程 的工具 限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶 运载体 目的基因与运载体结合 目的基因的表达和检测 将目的基因导入受体细胞 提取目的基因 ⒈要使目的基因与对应的载体重组, 所需的两种酶是( ) ①限制酶 ②连接酶 ③解旋酶 ④还原酶 A.①② B.③④ C.①④ D.②③ 2.基因工程的正确操作步骤是( ) ①使目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特 定性状要求 ④提取目的基因 A. ③②④① B. ②④①③ C. ④①②③ D. ③④①② 3、在基因工程中,切割运载体和含有目 的基因的DNA片段,需使用( ) A、两种连接酶 B、两种限制酶 C、同种连接酶 D、同种限制酶 4、实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA分子的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是利用了酶的( ) A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性易受外界影响 5、以下是两种不同的限制酶切割形成的 DNA片段:
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