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盐水介质法、凝聚胺法、微柱凝胶法三种交叉配血方法的应用比较
精品论文 参考文献
盐水介质法、凝聚胺法、微柱凝胶法三种交叉配血方法的应用比较
杨胜高
(贵州省遵义市余庆县人民医院检验科 564400)
【摘要】目的 对盐水介质法、凝聚胺法及微柱凝胶法三种交叉配血方法的应用进行分析与对比。方法 选取2013年1月-2014年1月在我院需要输血的患者730人次,通过凝聚胺法与盐水介质法对这些患者进行交叉配血,对患者实施交叉配血后,通过微柱凝胶法对可疑标本与阳性标本实施配血,并进行复查对比。结果 730名交叉配血患者中,2名患者存在供血者的不完全抗体,而且盐水介质法并没有将其不规则抗体查出来,微柱凝胶法与凝聚胺法所检测出的不完全抗体者有2名,最终属于恶性肿瘤患者与红细胞浓度过高的患者。结论 研究结果表明,盐水介质法具有比较差的敏感性,凝聚胺法自动化性高,而且快速、简单,微柱凝胶法具有更高的敏感性、安全性以及更强的实用性。
【关键词】 微柱凝胶法 凝聚胺法 盐水介质法 交叉配血
【中图分类号】R45 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)20-0180-01
输血是临床上挽救、治疗病人的重要措施之一,为了保证安全、快速、有效输血,输血前做交叉配血试验,以检查受血者血液中的红细胞血型抗原及其抗体与供血者血液中的红细胞血型抗原及其抗体相互间的配合性是一个关键的环节。目前交叉配血方法有盐水法、木瓜酶法、抗人球蛋白法及凝聚胺法。而临床上常用的方法是盐水法、凝聚胺法和抗人球蛋白法。抗人球蛋白法又有经典的试管法和微柱凝胶法。本文选取730人次2013年1月-2014年1月在我院需要输血的患者,对其实施交叉配血,总结微柱凝胶法复查资料,并对检测结果进行分析,具体报告如下:
1.资料与方法
1.1一般资料
选取730人次2013年1月-2014年1月在我院需要输血的患者,其中有416名男性,314名女性,年龄12-86岁,平均年龄为(56.7plusmn;10.4)岁,以遵义市中心血站提供的成分血作为供血者。通过凝聚胺法与盐水介质法对患者实施交叉配血后,通过微柱凝胶法对可疑标本与阳性标本实施配血复查对比。
1.2器材与试剂
所选用的试剂与器材有:由悬浮液、低离子溶液以及凝聚胺液所组成的凝聚胺试剂盒、生理盐水、刻度滴管、小试管、显微镜、离心机、加样器、记号笔以及微柱凝胶孵育器。
1.3方法
1.3.1血液标本准备
a.取供血者与受血者2ml的抗凝静脉血,必须保证EDTA抗凝充分,离心时间为1min,速度为3000r/min,对供血者与受血者的血清进行分离;b.用0.9%生理盐水将供血者与受血者的红细胞配成5%红细胞悬液,留以备用[1]。
1.3.2凝聚胺法交叉配血
a. 取小试管2支,分别标明主、次侧,在主侧管中分别加受血者血清和供血者5%的红细胞悬液各1 滴,混匀,次侧管反之。
b.将0.6ml低离子溶液分别加在主次侧管中,混匀,再向两管中各滴加2滴凝聚胺液,再次混匀,用离心机以1000r/min离心10秒钟,将上清液除去,对红细胞在试管底部的聚集情况进行观察,如果两个试管中的反应物都没有发生凝集,那么一定重新检测。
c.最后将2滴悬浮液加入在两个试管中,对试管进行轻轻转动,混匀,对其结果进行观察[2]。如果在40-60s内出现凝聚散开的情况,说明是由悬浮液所导致的非特异性凝聚,符合配血结果;若没有发生凝集散开的情况,那么则表示结合红细胞抗原体的特异性反应,不符合配血结果;如果反应出现可疑现象,那么则需要用显微镜在玻片上做进一步的观察。
1.3.3盐水介质法
a.选择2支小试管,试管主次侧分别标明,在主侧管中各滴一滴供血者红细胞悬液与受血者血清,混匀,在主侧管中各滴一滴供血者血清与受血者红细胞悬液。
b.以速度为1000r/min进行1Min的离心,对其结果进行观察,首先,先观察试管上清有无溶血,再轻轻转动试管,或者轻轻弹动试管,对试管底部是否有反应物进行观察。
1.3.4微柱凝胶法
a.用生理盐水分别配成0.5%-1%的红细胞悬液。
b.在凝胶卡上标记注明主次侧, 用加样器分别吸取供、受者0.5%红细胞悬液50 l, 供、受者血清25 l置相应微管腔上端, 于37℃孵育15 min 取出,离心(1 500 r/min)3min,肉眼观察结果。均匀沉于管底者为阴性, 将强度一个“+”以上的标本判定为阳性标本, 对卡式配血次侧反应阳性的标本, 应加用患者自身红细胞作对照试验, 以判断患者体内有无致敏红细胞的存在。
2.结果
所选取的730人次的交叉配血
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